淫羊藿苷和淫羊藿次苷Ⅱ对内皮细胞eNOS表达和NOS活性的影响

目的：用过表达表皮生长因子受体（epidermal growth factor receptor, EGFR）的猪动脉内皮细胞（porcine aorta endothelial, PAE）作为研究对象，探讨淫羊藿苷(icariin)和淫羊藿次苷Ⅱ(icarisideⅡ)对PAE中内皮型一氧化氮合酶（endothelial nitric oxide synthase, eNOS)表达和一氧化氮合酶(nitric oxide sythase, NOS)活性的影响及其可能机制。方法：利用PAE中转染EGFR并筛选稳定株, 分别用12.5 μmol/L的淫羊藿苷和淫羊藿次苷Ⅱ处理PAE和PAE-EGFR细胞48 h，观察各组细胞eNOS的表达变化；另在淫羊藿苷或淫羊藿次苷Ⅱ处理PAE和PAE-EGFR细胞时，分别加入表皮生长因子（epidermal growth factor, EGF）共同处理细胞，观察各组细胞eNOS的表达变化；检测淫羊藿苷和淫羊藿次苷Ⅱ处理前后PAE和PAE-EGFR细胞NOS的酶活性改变，并以西地那非作为对照。结果：Western blot显示PAE-EGFR细胞表达eNOS的基础值要比PAE细胞高，淫羊藿苷和淫羊藿次苷Ⅱ处理时PAE和PAE-EGFR细胞株中都能引起eNOS表达增加，并且在PAE-EGFR稳定株中eNOS的表达量比PAE细胞明显提高(P<0.01)；在表达EGFR的PAE-EGFR细胞中，当淫羊藿次苷Ⅱ的浓度达到10^-8 mol/L时，NOS活性增加到(15.37±1.49) u/mg ，比PAE细胞高4.66 u/mg。在药物浓度达到10^-7，10^-6和10^-5 mol/L时，淫羊藿次苷Ⅱ对PAE-EGFR细胞NOS活性的影响较PAE细胞显著增加(P<0.01)；淫羊藿苷也能增加PAE和PAE-EGFR细胞的NOS酶活性，但是其效果比较淫羊藿次苷Ⅱ组平均低20%，而西地那非没有显著影响NOS酶活性。 结论：淫羊藿苷和淫羊藿次苷Ⅱ可上调PAE和PAE-EGFR细胞eNOS的表达和提高NOS活性，对血管内皮细胞功能可能具有改善作用，而且淫羊藿次苷Ⅱ的效果优于淫羊藿苷,其作用机制可能与激活PAE细胞的EGF-EGFR信号通路有关。

Effects of icariin and icariside II on eNOS expression and NOS activity in porcine aorta endothelial cells