高表达miR-25-3p对小鼠骨实质来源间充质干细胞成脂分化的抑制作用

目的 探究miR-25-3p对小鼠骨实质来源间充质干细胞（MSC）成脂分化的影响。方法 (1)取1周龄C57BL/6J小鼠胫骨和股骨分离培养MSC。体外培养扩增至P3代，吉姆萨染色，倒置显微镜镜下观察其形态；用流式细胞术检测其细胞表型；经成脂和成骨诱导液分别诱导分化7和14 d，分别用油红O染色和碱性磷酸酶染色检测其体外成脂和成骨分化能力，并用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测其成脂分化关键转录因子CCAAT增强子结合蛋白α(CEBPα)和过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARγ)以及成骨标志性蛋白骨钙素（OCN）和成骨分化关键转录因子Runx相关转录因子2(Runx2)mRNA表达。(2)合成与MSC成脂分化相关的微RNA(miRNA)即miR-25-3p模拟物，将miR-25-3p模拟物及其对照miRNA分别瞬时转染P3代MSC，用荧光显微镜观察转染细胞Cy3红色荧光强度鉴定细胞转染效率，RT-qPCR检测转染细胞miR-25-3p表达水平。(3)将未转染、转染对照miRNA和转染miR-25-3p模拟物的P3代MSC成脂诱导分化7 d，用油红O染色检测细胞脂滴形成数目，RT...