| 利用流式细胞仪检测人外周血NK细胞毒性方法的建立 |
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| 引用本文： | 张俊,钱亚云,龚卫娟,胡茂志,季明春.利用流式细胞仪检测人外周血NK细胞毒性方法的建立[J].实用临床医药杂志,2006,10(4):28-31,35. |
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| 作者姓名： | 张俊 钱亚云 龚卫娟 胡茂志 季明春 |
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| 作者单位： | [1]江苏省扬州市第四人民医院检验科,江苏扬州225003 [2]扬州大学医学院免疫学教研室,江苏扬州225001 [3]扬州大学测试中心,江苏扬州225009 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金（30400399）,江苏省自然科学基金（BK2004404）,江苏省高校自然科学基金（04KJB320162） |
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| 摘 要： | 目的利用流式细胞仪（FAcs）技术检测人外周血NK细胞的毒性。方法首先将pEGFP-N1质粒转染人NK细胞的天然靶细胞K562，经过G418筛选后进一步单克隆化，得到稳定、均一表达绿色荧光蛋白的K562细胞。取对数期的K562-EGFP细胞与人外周血单个核细胞分别按5：1、10：1、20：1、40：1的比例混合，分别孵育0．5、1、2、4h后用碘化丙啶（PI）标记，用流式细胞仪分析呈红、绿色荧光的细胞数，最后计算NK细胞的杀伤效率。结果0．5、1、2、4h均能得到明显的杀伤效果，而且以2h的杀伤率最高。此时杀伤率与传统乳酸脱氢酶法（LDH）具有显著相关性（7=0．997，P=0．003），而且显示出更强的敏感性。结论利用流式细胞仪检测NK细胞毒活性的方法可作为传统^51Cr释放法、LDH法的一个补充，而且具有经济、快速和敏感的特点。
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| 关 键 词： | 流式细胞仪 NK细胞 细胞毒性 K562-EGFP |
| 文章编号： | 1672-2353（2006）04-0028-04 |
| 收稿时间： | 2005-10-26 |
MEASURING HUMAN PERIPHERAL NK CELL CYTOTOXICITY WITH FLOW CYTOMETRY |
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| ZHANG Jun, QIAN Ya-yun, GONG Wei-juan, HU Mao-zhi, JI Ming-chun.MEASURING HUMAN PERIPHERAL NK CELL CYTOTOXICITY WITH FLOW CYTOMETRY[J].Journal of Clinical Medicine in Practice,2006,10(4):28-31,35. |
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| Authors: | ZHANG Jun QIAN Ya-yun GONG Wei-juan HU Mao-zhi JI Ming-chun |
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| Keywords: | flow cytometry NK cells cytotoxicity K562-EGFP |
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