| 慢病毒介导的敲低UBC9表达抑制ERβ类泛素化修饰水平 |
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| 引用本文： | 李玮妮,陈立涵,程龙,徐小洁,付洁,关鑫,刘婕,张浩,叶棋浓.慢病毒介导的敲低UBC9表达抑制ERβ类泛素化修饰水平[J].军事医学,2013,37(3):187-190. |
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| 作者姓名： | 李玮妮 陈立涵 程龙 徐小洁 付洁 关鑫 刘婕 张浩 叶棋浓 |
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| 作者单位： | 李玮妮 (军事医学科学院生物工程研究所,北京,100850)；陈立涵 (军事医学科学院生物工程研究所,北京,100850)； 程龙 (军事医学科学院生物工程研究所,北京,100850)； 徐小洁 (军事医学科学院生物工程研究所,北京,100850)； 付洁 (军事医学科学院生物工程研究所,北京,100850)；关鑫 (军事医学科学院生物工程研究所,北京,100850)；刘婕 (军事医学科学院生物工程研究所,北京,100850)； 张浩 (军事医学科学院生物工程研究所,北京,100850)； 叶棋浓 (军事医学科学院生物工程研究所,北京,100850)； |
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| 基金项目： | 北京市自然科学基金资助项目(7112101);国家973计划资助项目(2011CB504200) |
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| 摘 要： | 目的建立稳定敲低UBC9蛋白表达的293T细胞株,检测其对雌激素受体β(ERβ)类泛素化修饰水平的调节作用。方法构建4条针对人UBC9基因的慢病毒短发夹RNA(shRNA)的干扰载体,将其与慢病毒包装辅助质粒共转染293T细胞后,收集病毒上清,感染293T细胞,经嘌呤霉素(puromycin)筛选后获得稳定表达慢病毒介导UBC9 shRNA的混合细胞集落,分别用实时(real-time)PCR和Western印迹方法检测UBC9的表达情况,瞬时转染方法检测UBC9表达水平对ERβ类泛素化修饰水平的影响。结果建立了稳定敲低UBC9的293T细胞株,UBC9降低能够抑制ERβ类泛素化修饰水平。结论 UBC9在ERβ类泛素化修饰反应中发挥重要作用。
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| 关 键 词： | 慢病毒属 UBC9 ERβ 类泛素化修饰 RNA干扰 |
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