| 药用植物胡黄连ISSR-PCR反应体系的建立与优化 |
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| 引用本文： | 刘小莉,普春霞,杨耀文,钱子刚.药用植物胡黄连ISSR-PCR反应体系的建立与优化[J].时珍国医国药,2010,21(6). |
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| 作者姓名： | 刘小莉 普春霞 杨耀文 钱子刚 |
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| 作者单位： | 1. 云南中医学院·中药学院,云南,昆明,650500;云南大学生命科学学院,云南,昆明,650091
2. 云南中医学院·中药学院,云南,昆明,650500 |
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| 基金项目： | 国家科技基础性工作专项重点项目子课题 |
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| 摘 要： | 目的 优选胡黄连稳定的ISSR-PCR反应体系.方法 采用4因素(dNTPs、Mg2+、Taq酶、引物)4水平的正交实验和单因子梯度优化相结合的方法.结果 适于胡黄连的25 μl的ISSR-PCR反应体系中各因素最佳浓度分别为10×buffer2.5 μl,dNTPS150 μmol/L,Mg2+1.5 mmol/L,Taq酶1U,引物0.5μmol/L,DNA20 ng或10×buffer 2.5 μl,dNTPs150 μmol/L,Mg2+2 mmol/L,Taq酶0.5U,引物0.5 μmol/L,DNA20 ng.结论 对于胡黄连ISSR-PCR实验,一次正交实验完全可以建立起满足要求的PCR体系.
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| 关 键 词： | 胡黄连 正交实验 单因子 |
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