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成纤维细胞生长因子18对体外培养兔骨髓基质干细胞碱性磷酸酶合成的影响
引用本文:田竞,杨帆,李秀岩,李林,项良碧,祖启明,范清宇.成纤维细胞生长因子18对体外培养兔骨髓基质干细胞碱性磷酸酶合成的影响[J].中国组织工程研究与临床康复,2006,10(21):7-9.
作者姓名:田竞  杨帆  李秀岩  李林  项良碧  祖启明  范清宇
作者单位:1. 解放军沈阳军区总医院骨科,辽宁省沈阳市,110016
2. 解放军第四军医大学口腔医学院,陕西省西安市,710032
3. 解放军沈阳军区司令部门诊,辽宁省沈阳市,110001
4. 解放军第四军医大学唐都医院骨科,陕西省西安市,710038
基金项目:国家自然科学基金重点项目(30330610),“十五”军队重点项目(01Z091)~~
摘    要:目的:构建可稳定表达成纤维细胞生长因子18蛋白的真核表达载体,观察成纤维细胞生长因子18对体外培养的兔骨髓基质干细胞碱性磷酸酶合成的影响。方法:本实验于2002-10/2004-03在解放军第四军医大学全军骨肿瘤研究所及口腔医学院完成。①将pGEM-T-FGF18-3和pSecTag2B表达载体分别用KpnⅠ和NotⅠ酶切后重组pSecTag2B-FGF18质粒;ELISA检测转染后COS-7细胞上清的成纤维细胞生长因子18蛋白,以大于阴性对照A值2.1倍以上为阳性结果。②用细胞上清刺激骨髓基质干细胞,根据含小牛血清的DMEM不同比例稀释转染后COS-7细胞上清分为1∶2稀释组、1∶4稀释组、1∶8稀释组、1∶16组、1∶32稀释组;对照组∶用含体积分数为0.02小牛血清的DMEM培养液按1∶2稀释未转染的COS-7细胞上清。③通过酶动力法检测细胞碱性磷酸酶合成情况。结果:①成功构建了pSecTag2B-FGF18真核表达载体。②转染哺乳动物细胞COS-7用夹心ELISA法检测到了成纤维细胞生长因子18蛋白质的稳定表达,原液及1∶10稀释度细胞上清A值大于阴性对照A值2.1倍以上(P<0.01)。③用细胞上清刺激骨髓基质干细胞72h后,1∶2稀释组、1∶4稀释组、1∶8稀释组、1∶16组、1∶32稀释组骨髓基质干细胞A值较对照组明显增高(P<0.01),证实了成纤维细胞生长因子18对体外培养的兔骨髓基质干细胞碱性磷酸酶合成的促进作用。结论:成纤维细胞生长因子18有显著促进体外培养的兔骨髓基质干细胞碱性磷酸酶合成的作用,提示成纤维细胞生长因子18对于骨髓基质干细胞的分化及成骨表型的维持起着重要的调节作用。

关 键 词:成纤维细胞  骨髓细胞  干细胞  碱性磷酸酶
文章编号:1671-5926(2006)21-0007-03
修稿时间:2005年12月20

Effects of fibroblast growth factor 18 on synthesis of alkaline phosphatase in bone marrow stem cells of rabbits culturedin vitro
Tian Jing,Yang Fan,Li Xiu-yan,Li Lin,Xiang Liang-bi,Zu Qi-ming,Fan Qing-yu.Effects of fibroblast growth factor 18 on synthesis of alkaline phosphatase in bone marrow stem cells of rabbits culturedin vitro[J].Journal of Clinical Rehabilitative Tissue Engineering Research,2006,10(21):7-9.
Authors:Tian Jing  Yang Fan  Li Xiu-yan  Li Lin  Xiang Liang-bi  Zu Qi-ming  Fan Qing-yu
Abstract:
Keywords:
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