| VEGF基因表达载体的构建及其表达 |
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| 引用本文： | 王法刚,赵敏,黄秉仁.VEGF基因表达载体的构建及其表达[J].山东医药,2002(33). |
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| 作者姓名： | 王法刚 赵敏 黄秉仁 |
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| 作者单位： | [1]山东省立医院 [2]中国协和医科大学整形外科医院 [3]中国协和医科大学基础医学研究所 山东济南 |
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| 摘 要： | 为构建血管内皮生长因子(VEGF)基因的表达载体,以人胎肝cDNA库为模板,应用多聚酶链反应(PCR)技术,扩增全长的VEGF165cDNA序列,定向连接进质粒pcDNA3.1/Zeo( )的多克隆位点中,以重组质粒转染体外培养的293细胞,收集不同时相细胞裂解液进行蛋白质的聚丙烯酰胺凝胶电泳,以抗人VEGF165单克隆抗体行Westen blotting检测,观察VEGF基因的表达情况。结果显示选择合适的退火温度和引物,可以自人胎肝cDNA库中特异性地扩增VEGF165的cDNA序列。所构建的pcDNA3.1/Zeo( )-VEGF165真核表达载体系统能较好地转染体外培养的293细胞,Westen blotting检测到特异性表达条带。提示重组的VEGF165基因表达载体能够成功转染哺乳动物细胞,并表达目的基因,为解决组织移植中血运重建问题提供了一条基因治疗途径。
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| 关 键 词： | 基因 PCR技术 质粒 转染 |
Expression of recombined plasmid encoding vascular endothelial growth factor |
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| Wang Fagang,Zhao Min,Huang Bingren.Expression of recombined plasmid encoding vascular endothelial growth factor[J].Shandong Medical Journal,2002(33). |
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| Authors: | Wang Fagang Zhao Min Huang Bingren |
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| Institution: | Wang Fagang;Zhao Min;Huang Bingren |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Gene therapy PCR Plasmid Transfection |
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