| pEGFP-C1/Akt体外转染骨髓间充质干细胞对后肢缺血大鼠血管生成的影响 |
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| 引用本文： | 霍鑫,冯金炜,刘方峰,孔宏亮,严永吉,张强.pEGFP-C1/Akt体外转染骨髓间充质干细胞对后肢缺血大鼠血管生成的影响[J].中国普外基础与临床杂志,2008,15(6):402-407. |
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| 作者姓名： | 霍鑫 冯金炜 刘方峰 孔宏亮 严永吉 张强 |
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| 摘 要： | 目的 探讨经肌肉注射转染pEGFP-C1/Akt的鼠骨髓间充质干细胞(MSCs)对后肢缺血大鼠血管生成的影响.方法 Wistar大鼠30只,制成双后肢缺血模型,双盲法随机分为基因治疗组(肌注经pEGFP-C1/Akt转染的MSCs)、非基因治疗组(肌注MSCs)及对照组(肌注PBS液).造模前、造膜后即刻及MSCs移植后1～7 d内,每天用红外线皮温仪测定大鼠后肢皮温变化.28 d时经动脉造影观察后肢血管生成情况; 免疫组化染色检测后肢毛细血管密度; 逆转录-多聚酶链反应(RT-PCR)和Western blot法检测后肢肌肉组织中Akt及血管内皮细胞生长因子(VEGF)的 mRNA和蛋白的表达.结果 移植3 d后基因治疗组大鼠后肢皮温升高明显.28 d时经动脉造影观察基因治疗组后肢侧支血管生成明显; 荧光显微镜观察有绿色荧光细胞在基因治疗组的内收肌和半膜肌分布.毛细血管密度: 基因治疗组为(7.1±0.3)个/高倍镜,非基因治疗组为(4.2±0.4)个/高倍镜,对照组为(1.3±0.2)个/高倍镜,各组间差异均有统计学意义(P＜0.01).Akt及VEGF的 mRNA和蛋白的表达分析: 基因治疗组Akt mRNA(2.44±0.14)和蛋白(1.12±0.13)及VEGF mRNA(1.11±0.11)和蛋白(0.97±0.13)表达水平均明显高于非基因治疗组Akt mRNA(1.58±0.13)和蛋白(0.78±0.12)及VEGF mRNA(0.78±0.14)和蛋白(0.67±0.11)以及对照组Akt mRNA(0.64±0.11)和蛋白(0.36±0.12)及VEGF mRNA(0.56±0.11)和蛋白(0.33±0.13)的表达水平(P＜0.01),后2组间比较差异亦均有统计学意义(P＜0.01).结论 pEGFP-C1/Akt体外转染骨髓MSCs促进后肢缺血大鼠血管生成的效果优于单纯MSCs治疗,为基因转染MSCs治疗缺血性疾病提供可能.
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| 关 键 词： | 骨髓间充质干细胞 增强型绿色荧光蛋白 Akt基因 后肢缺血 血管生成 体外转染 骨髓间充质干细胞 缺血性疾病 大鼠 血管生成 影响 Bone Mesenchymal Stem Cells Effect Mice Hindlimb Ischemic 基因转染 治疗 效果 比较差异 表达水平 表达分析 统计学意义 组间差异 分布 |
Effect of Bone Mesenchymal Stem Cells Transfected with pEGFP-C1 /Akt on Angiogenesis in Ischemic Hindlimb of Mice |
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| HUO Xin,FENG Jin-wei,LIU Fang-feng,KONG Hong-liang,YAN Yong-ji,ZHANG Qiang.Effect of Bone Mesenchymal Stem Cells Transfected with pEGFP-C1 /Akt on Angiogenesis in Ischemic Hindlimb of Mice[J].Chinese Journal of Bases and Clinics In General Surgery,2008,15(6):402-407. |
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| Authors: | HUO Xin FENG Jin-wei LIU Fang-feng KONG Hong-liang YAN Yong-ji ZHANG Qiang |
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