注射肿瘤坏死因子-α对大鼠脑缺血再灌注的影响

背景：一些研究提示肿瘤坏死因子-α预注射对小鼠局灶性脑缺血可产生保护作用，脑缺血耐受与血浆肿瘤坏死因子-α水平增高有关。另一方面，肿瘤坏死因子-α是与脑卒中有关的一个有害细胞因子，抗肿瘤坏死因子-α循环抗体对再灌注损伤起保护作用。目的：探讨脑缺血再灌注前、后不同时期注射肿瘤坏死因子-α对大鼠脑缺血灶的影响，是保护作用还是毒性作用。设计：随机对照实验。单位：哈尔滨医科大学附属第二医院神经科。材料：实验于2002-01／2002-04在哈尔滨医科大学动物实验中心完成；选择健康雄性Wistar大鼠120只，随机将大鼠分为8组：预注射肿瘤坏死因子-α0．05，0．5，1．0μg及磷酸盐缓冲液对照组，后注射肿瘤坏死因子-α0．05，0．5，1．0μg及磷酸盐缓冲液对照组，每组15只。方法：制备大鼠大脑中动脉局灶性脑缺血模型。缺血前48h或缺血2h再灌注后，在大鼠小脑延髓池内分别注射不同剂量肿瘤坏死因子-α（0．05μg，0．5μg，1．0μg）或磷酸盐缓冲液。①各组取8只大鼠，于脑缺血2h再灌注22h，麻醉下处死取脑，制备TFC切片，用计算机图像分析系统测定每个脑片面积及梗死面积，然后计算梗死体积百分比。②各组取7只大鼠，于缺血2h再灌注22h后，麻醉下处死取脑，行HE、GFAP和ICAM-1免疫组化染色，用显微镜和计算机图像分析系统分析组织病理和免疫组化切片，计算胶质纤维酸性蛋白阳性细胞数目及每侧半球细胞内黏附分子-1阳性血管数。主要观察指标：①各组大鼠脑梗死体积百分比。②各组大鼠脑组织病理学观察。③各组大鼠脑组织胶质纤维酸性蛋白和细胞间黏附分子-1蛋白表达情况。结果：120只大鼠全部进入结果分析。①脑梗死体积百分比：肿瘤坏死因子-α0．5μg预注射组及1．0μg预注射组脑梗死体积减小，0．5μg预注射组脑梗死体积百分比减小70．9％，1．0μg预注射组减小66．5％；肿瘤坏死因子-α0．5μg后注射及1．0μg后注射组脑梗死体积增加，0．5μg后注射组脑梗死体积百分比增加22.3％，1．0μg后注射组增加46．7％。肿瘤坏死因子-α0．5μg预注射组与1．0μg预注射组间比较无显著差异（P〉0．05），肿瘤坏死因子-α0．5μg后注射组与1．0μg后注射组间比较有显著差异（P〈0．05）。②病理变化：肿瘤坏死因子-α0．5μg预注射组及1．0μg预注射组脑组织变性坏死程度减轻；肿瘤坏死因子-α0．5μg后注射及1．0μg后注射组脑组织变性坏死程度加重。③胶质纤维酸性蛋白和细胞间黏附分子-1蛋白的表达：肿瘤坏死因子-α0．5μg预注射组及1．0μg预注射组胶质纤维酸性蛋白和细胞间黏附分子-1蛋白表达减少（P均〈0．05）；肿瘤坏死因子-α0．5μg注射及1．0μg后注射组胶质纤维酸性蛋白和细胞间黏附分子-1蛋白表达增加（P均〈0．05）；肿瘤坏死因子-α0．5μg预注射组与1．0μg预注射组间比较无显著差异（P均〉0．05），肿瘤坏死因子-α0．5μg后注射组与1．0μg后注射组间比较有显著差异（P均〈0．05）。结论：④肿瘤坏死因子-α预注射对脑缺血再灌注损伤有神经保护作用，该作用与星形胶质细胞的修复作用无关，而与细胞间黏附分子-1表达减少有关。②在脑缺血再灌注后给肿瘤坏死因子-α则加重脑缺血，该作用与细胞间黏附分子-1表达增加有关。③脑缺血前或脑缺血后给予肿瘤坏死因子-α决定了它的作用效果，这两种作用都有剂量依赖性。

Effect of tumor necrosis factor alpha treatment on cerebral ischemia-reperfusion injury in rats