miR-544a对非小细胞肺癌细胞系Wnt信号通路抑制因子GSK3β表达的调控作用 |
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引用本文: | 李化会,莫晓媚,孙桂荣.miR-544a对非小细胞肺癌细胞系Wnt信号通路抑制因子GSK3β表达的调控作用[J].临床检验杂志,2013,31(10):761-764. |
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作者姓名: | 李化会 莫晓媚 孙桂荣 |
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作者单位: | 青岛大学医学院,山东青岛266011/青岛市市立医院检验科,山东青岛266011;青岛市妇女儿童医院药剂科,山东青岛266011;青岛大学医学院附属医院检验科,山东青岛266003 |
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摘 要: | 摘要:目的:探讨微小RNA-544a(miR-544a)对肺癌干细胞的自我更新能力影响及其可能的机制。 方法:通过生物信息学预测miR-544a的靶向基因,用荧光素酶报告系统及western blot验证其靶向关系;构建稳定表达miR-544a的非小细胞肺癌(NSCLC)细胞系95C和95D,并用荧光定量PCR验证;用肿瘤球悬浮培养实验检测miR-544a在形成肿瘤球中的作用。 结果:生物信息学预测发现,miR-544a可以靶向调节Wnt信号通路的抑制子GSK3β,并通过荧光素酶报告系统得到了验证(F=201.37,P<0.01);western blot结果显示,miR-544a可以下调GSK3β的表达,而β-catenin、CD133蛋白表达水平明显上调(F分别为7.73,3.37,9.43,P均<0.01);荧光定量PCR结果显示,95C、95D细胞在转染miR-544a后,miR-544a表达水平增高,分别为20.51±0.97、15.16±1.38 (F=418.05,P<0.01)。肿瘤球悬浮培养实验发现,稳定表达miR-544a的细胞能够反复形成具有肿瘤干细胞特性的肿瘤球。 结论:miR-544a可以通过直接下调GSK3β的表达来激活Wnt信号通路,以维持肺癌干细胞自我更新能力。
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关 键 词: | miR-544a 非小细胞肺癌 肿瘤干细胞 GSK3β Wnt信号通路 |
收稿时间: | 2013/7/30 0:00:00 |
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