| 实时荧光定量PCR检测尿液CK20方法的建立 |
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| 引用本文： | 郭斌,罗春丽,荀春华,谢建红,吴小候,蒲军.实时荧光定量PCR检测尿液CK20方法的建立[J].重庆医科大学学报,2009,34(6). |
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| 作者姓名： | 郭斌 罗春丽 荀春华 谢建红 吴小候 蒲军 |
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| 作者单位： | 1. 重庆医科大学医学检验系临床检验诊断学教育部重点实验室
2. 重庆医科大学附属第一医院泌尿外科,重庆,400016 |
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| 摘 要： | 目的:建立一种简便、快速、灵敏度和特异性较好的定量检测尿液CK20方法,用于膀胱移行细胞癌(Transitional cell ear-cinoma of the bladder,TCCB)早期诊断、预后及复发的评估.方法:培养膀胱癌T24细胞,针对CK20基因保守序列设计合成两对引物和Taqman探针,将PCR扩增产物片段克隆,作为定量检测的标准品,优化反应条件,建立快速检测CK20mRNA的实时荧光定量PCR方法,并进行方法学评价.结果:荧光定量PCR检测尿液CK20方法能较好的定量枪出尿液CK20mRNA,检测范围为102～102copies/μ1,灵敏度为102 copies/μ1,特异性好,批内、天间重复性(Coefficient of variation,CV)分别为0.89%和2.45%.结论:成功建立了快速检测尿液CK20的荧光定量PCR方法,为进一步开发出用于TCCB早期诊断、预后及复发评估的定量检测试剂盒奠定了基础.
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| 关 键 词： | 膀胱移行细胞癌 实时荧光定量PCR |
Development of fluorescent quantitation PCR method for detection of urinary CK20 |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | CK20 |
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