| 携带大鼠白细胞介素-10基因重组腺病毒载体的构建及其在肝星状细胞中的表达 |
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| 引用本文： | 熊亮发,冷希圣,郭晏同,魏玉华,李涛,赵力. 携带大鼠白细胞介素-10基因重组腺病毒载体的构建及其在肝星状细胞中的表达[J]. 中华实验外科杂志, 2004, 21(3): 316-318 |
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| 作者姓名： | 熊亮发 冷希圣 郭晏同 魏玉华 李涛 赵力 |
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| 作者单位： | 100044,北京大学人民医院肝胆外科中心 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金资助项目 (30 2 71 2 70 ) |
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| 摘 要： | 目的 构建载有白细胞介素 10 (IL 10 )基因的 ,能在肝星状细胞 (HSC)稳定表达的重组腺病毒载体 ,为将来的肝纤维化基因治疗提供基础。方法 将IL 10cDNA克隆于腺病毒穿梭质粒PAdTrack CMV ,得到重组质粒PadTrack CMV IL 10。采用电穿孔法将质粒PadTrack CMV IL 10与腺病毒骨架质粒PadEasy 1共转化E .coliBJ5 183细胞 ,通过在细胞内同源重组 ,生成带有IL 10基因的重组腺病毒载体。重组腺病毒质粒经过 2 93细胞的扩增及CsCl的纯化 ,感染HSC细胞。结果 经形态学、病毒DNA酶切、聚合酶链反应 (PCR)和逆转录 (RT ) PCR等方法的鉴定 ,证实了载体构建的正确性 ,经测定 ,病毒滴度为 2 .5× 10 10 efu/ml。结论 成功构建带有IL 10cDNA的重组腺病毒载体 ,所携带的IL 10载体能够转染大鼠HSC并在HSC中稳定表达 ,为进一步的研究打下了基础。
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| 关 键 词： | 白细胞介素-10 腺病毒载体 克隆 同源重组 |
| 修稿时间： | 2003-06-09 |
Construction of adenoviral vector carrying Rat IL-10 and its expression in hepatic stellate cell |
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| XIONG liangfa,LENG Xisheng,GUO Yantong,et al.. Construction of adenoviral vector carrying Rat IL-10 and its expression in hepatic stellate cell[J]. Chinese Journal of Experimental Surgery, 2004, 21(3): 316-318 |
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| Authors: | XIONG liangfa LENG Xisheng GUO Yantong et al. |
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| Affiliation: | XIONG liangfa,LENG Xisheng,GUO Yantong,et al.Department of Hepatobiliary Surgery,Peking University People's Hospital,Beijing 100044,China |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Interlukin-10 Adenoviral vector Clone Homologeous recombination |
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