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| 小分子GnRH-luffinS重组嵌合毒素的制备及其细胞毒性检测 | |
| 引用本文： | 刘艳华,康琳,高姗,王俊红,赵金银,高艳丽,胡瑞,王景林.小分子GnRH-luffinS重组嵌合毒素的制备及其细胞毒性检测[J].军事医学科学院院刊,2008,32(4). |
| 作者姓名： | 刘艳华 康琳 高姗 王俊红 赵金银 高艳丽 胡瑞 王景林 |
| 作者单位： | 1. 军事医学科学院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室,北京,100071 2. 武警医学院预防医学系,天津,300162 3. 西北农林科技大学动物医学院,陕西杨凌,712100 |
| 摘 要： | 目的:制备以小分子丝瓜素(luffin)S2为毒性部分,以Ⅰ型促性腺激素释放激素(GnRH)为导向部分的重组嵌合毒素GnRH-luffinS,体外检测其对肿瘤细胞的杀伤作用.方法:重叠PCR方法扩增GnRH-luffinS的基因,克隆至表达载体pET32a中,转化大肠杆菌BL21(DE3),挑取阳性克隆诱导表达,产物用Ni-NTA亲和层析柱纯化.纯化蛋白经重组肠激酶(rEK)切割去除Trx融合蛋白,XTT法检测重组毒素对HeLa, A549, HepG-2, SP2/0和鸡胚成纤维细胞(CEF)的体外细胞毒性.结果:成功构建了GnRH-luffinS的表达质粒,并在大肠杆菌中获得表达,纯化后的纯度为93%.GnRH-luffinS对HeLa,A549,HepG-2和SP2/0的IC50分别为67.19, 70.42, 84.44和106.25 μg/ml,而对CEF无作用.结论:重组毒素GnRH-luffinS对肿瘤细胞有一定的杀伤作用. |
| 关 键 词： | Ⅰ型促性腺激素释放激素 重组嵌合毒素 细胞毒性 |
Preparation and cytotoxic activity assay of micromolecule recombinant chimeric toxin GnRH-luffinS |
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| LIU Yan-Hua,KANG Lin,GAO Shan,WANG Jun-Hong,ZHAO Jin-Yin,GAO Yan-Li,HU Rui,WANG Jing-Lin.Preparation and cytotoxic activity assay of micromolecule recombinant chimeric toxin GnRH-luffinS[J].Bulletin of the Academy of Military Medical Sciences,2008,32(4). | |
| Authors: | LIU Yan-Hua KANG Lin GAO Shan WANG Jun-Hong ZHAO Jin-Yin GAO Yan-Li HU Rui WANG Jing-Lin |
| Abstract: | |
| Keywords: | luffinS2 |
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