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| 人肝再生增强因子cDNA的克隆及其酵母双杂交载体的构建 | |
| 引用本文： | 陈思强,佟明华,孔祥平,姚汝华,易学瑞,潘韵.人肝再生增强因子cDNA的克隆及其酵母双杂交载体的构建[J].中国免疫学杂志,2003,19(3):187-190. |
| 作者姓名： | 陈思强 佟明华 孔祥平 姚汝华 易学瑞 潘韵 |
| 作者单位： | 1. 华南理工大学生物工程系,广州,510641 2. 解放军第458医院传染病中心,广州,510602 3. 浙江大学农业工程与食品科学院,杭州,310029 |
| 摘 要： | 目的：获取人肝再生增强因子（hALR)阅读框的cDNA及构建其酵母双杂交系统的“诱饵”质粒。方法：利用RT－PCR方法，从人胎肝组织中扩增出一约380bp的DNA片段，重组入pGBKT7载体中，构建成pGBKT7-hALR，然后研究此重组质粒在酵母AH109中的表达情况并用于筛选人肝cDNA文库，结果：获得的378bp的DNA序列与文献报道的人ALR序列一致；转化的酵母细菌在选择性培养基SD／-Trp上培养65小时，长出约Φ1mm大小的白色菌落，而在SD／－Trp/-His上不生长；酵母提取液的Western blot分析，证实ALR基因在AH109以融合蛋白的形式表达，并具有免疫活性；初步得到hALR相互作用的阳性克隆。结论：pGBKT7-hALR对宿主菌AH109没有毒性作用，也没有自身激活报告基因，可作为酵母双杂交系统中的“诱饵”质粒。 |
| 关 键 词： | 肝再生增强因子 酵母双杂交系统 克隆 |
| 文章编号： | 1000-484X(2003)03-0187-04 |
Cloning of human ALR cDNA and construction of its yeast two-hybrid plasmid |
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| Abstract: | |
| Keywords: | Augumenter of liver regeneration Yeast two hybrid system Clone |
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