| 人NKX3.1基因启动子的克隆及在不同肿瘤细胞系中启动子活性的测定(英) |
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| 引用本文： | 姜安丽,张鹏举,胡晓燕,陈蔚文,贺美兰,孔峰,张建业.人NKX3.1基因启动子的克隆及在不同肿瘤细胞系中启动子活性的测定(英)[J].中国病理生理杂志,2006,22(10):1987-1992. |
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| 作者姓名： | 姜安丽 张鹏举 胡晓燕 陈蔚文 贺美兰 孔峰 张建业 |
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| 作者单位： | 山东大学医学院生物化学教研室， 山东 济南 250012 |
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| 基金项目： | Supported by the National Natural Science Foundation of China(No.30470952)，Shandong Province Natural Science Foundation(No.Y2004C26) |
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| 摘 要： | 目的：克隆NKX3.1基因启动子并检测其启动子活性，为研究NKX3.1 基因转录调控的基本机制奠定基础。 方法： 采用PCR方法从人基因组中扩增NKX3.1基因上游 1.04 kb 启动子片段并分别克隆到报道基因载体pGL3-basic和 pEGFP-1中，通过转染细胞、荧光素酶活性测定及荧光显微镜下观察绿色荧光蛋白的表达，检测其启动子活性。 结果： DNA测序结果证实克隆的 1.04 kb 启动子片段序列正确；pGL3-1.04 kb 启动子转染LNCaP细胞后，双荧光素酶活性测定M1/M2=2.7, 为pGL3-control 活性的1.5倍，为pGL3-basic活性的50倍。表明克隆的人NKX3.1基因上游 1.04 kb 片段具有较强的启动子活性。为检测此 1.04 kb 启动子在不同组织细胞中的活性，分别将pGL3-1.04 kb 启动子和pEGFP-1.04 kb启动子转染入不同的肿瘤细胞系，检测荧光素酶和绿色荧光蛋白的表达。结果显示 1.04 kb 启动子在前列腺癌细胞LNCaP中活性最高。采用TRANSFAC数据库分析，发现在 1 040 bp 片段内含有多种顺式作用元件，它们的功能性将需要进一步实验证明。 结论： 克隆的人NKX3.1基因上游 1.04 kb 片段具有较强的启动子活性，并且在前列腺癌细胞LNCaP中活性最高。
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| 关 键 词： | 基因 NKX3.1 启动子 细胞系 基因表达 |
| 文章编号： | 1000-4718（2006）10-1987-06 |
| 收稿时间： | 2005-02-02 |
| 修稿时间： | 2005-02-022005-10-08 |
Cloning of human NKX3.1 gene promoter and assay of its promoter activity in different tumor cell lines |
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| JIANG An-li,ZHANG Peng-ju,HU Xiao-yan,CHEN Wei-wen,HE Mei-lan,KONG Feng,ZHANG Jian-ye.Cloning of human NKX3.1 gene promoter and assay of its promoter activity in different tumor cell lines[J].Chinese Journal of Pathophysiology,2006,22(10):1987-1992. |
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| Authors: | JIANG An-li ZHANG Peng-ju HU Xiao-yan CHEN Wei-wen HE Mei-lan KONG Feng ZHANG Jian-ye |
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| Institution: | Department of Biochemistry, Medical School of Shandong University, Jinan 250012, China |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Genes NKX3 1 Promoters Cell lines Gene expression |
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