| 全骨髓法分离培养骨髓间充质干细胞及向神经样细胞分化的研究 |
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| 引用本文： | 王鹏,沈忆新,陆政峰,毛路,范志海,包普花.全骨髓法分离培养骨髓间充质干细胞及向神经样细胞分化的研究[J].中国现代医药杂志,2009,11(1). |
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| 作者姓名： | 王鹏 沈忆新 陆政峰 毛路 范志海 包普花 |
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| 作者单位： | 1. 215004,江苏省苏州大学附属第二医院骨科
2. 苏州大学医学部干细胞与组织工程实验室 |
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| 基金项目： | 江苏省高校研究生科研创新计划 |
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| 摘 要： | 目的 目前尚缺乏标准的骨髓间充质干细胞(BMSCs)的分离方法 ,实验通过全骨髓培养法分离纯化骨髓间充质干细胞,并诱导分化为神经样细胞,以寻找一种简便、实用的分离方法 .方法 取大鼠骨髓.全骨髓培养法结合差速贴壁法分离纯化大鼠骨髓间充质干细胞,传代扩增.倒置相差显微镜下观察骨髓间充质干细胞形态及生物学特点,免疫组化染色鉴定细胞.用MTT法间接测定不同代数细胞活力.诱导分化.先用碱性成纤维细胞生长冈子(bFGF)预诱导24h,然后加入丁羟基茴香醚诱导(BHA)和二甲基亚砜(DMSO)诱导.观察诱导过程中细胞的形态变化,并用免疫组化染色法鉴定细胞.结果 全骨髓培养法成功分离培养BMSCs,免疫荧光染色示CD90、CD71、CD106表达阳性.CD45阴性.MTT法检测细胞活力示2、4、6代细胞于酶标仪490 nm波长处吸光度值均高于第8、10代细胞.细胞经诱导后,细胞呈神经样细胞形态,并且神经元特异性表面标志β微管蛋白(β-Ⅲ-Tubulin)、巢蛋白(Nestin)、神经元特异性烯醇化酶(NSE)表达阳性.结论 采用全骨髓培养法可获得较纯化的骨髓间充质干细胞,其在适宜的诱导分化条件下可诱导分化为神经样细胞.
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| 关 键 词： | 全骨髓培养法 骨髓间充质干细胞 诱导分化 |
The sdudy of differentiation of bone marrow mesenchymal stem cells into neural stem cells by whole bone marrow adherence method |
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