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STAT3基因短发卡RNA表达质粒的构建及其对胃癌细胞生长和侵袭的抑制作用
引用本文:童强,舒晓刚,卢晓明,肖勇,牛彦锋,黎维勇,陶凯雄,王国斌.STAT3基因短发卡RNA表达质粒的构建及其对胃癌细胞生长和侵袭的抑制作用[J].中国普外基础与临床杂志,2009,16(1).
作者姓名:童强  舒晓刚  卢晓明  肖勇  牛彦锋  黎维勇  陶凯雄  王国斌
作者单位:1. 华中科技大学同济医学院附属协和医院胃肠外科,武汉,430022
2. 华中科技大学同济医学院附属协和医院药剂科,武汉,430022
3. 华中科技大学同济医学院附属协和医院腔镜外科,武汉,430022
4. 华中科技大学同济医学院附属协和医院胃肠外科,武汉,430022;华中科技大学同济医学院附属协和医院腔镜外科,武汉,430022
基金项目:湖北省科技攻关计划课题 
摘    要:目的 构建信号传导及转录活化因子3(STAT 3)基因短发夹RNA(shRNA)表达质粒,探讨STAT 3抑制后对胃癌MKN-45细胞增殖、凋亡和侵袭的影响.方法 根据STAT 3 Mrna 编码序列,设计RNA干扰靶点,构建STAT 3基因的特异性小RNA干扰质粒(psiRNA-H1/STAT 3),使用脂质体转染MKN-45细胞,实验分为对照组、psiRNA-H1转染组和psiRNA-H1/STAT 3转染组.通过RT-PCR和Western blot检测STAT 3特异性小RNA干扰基因对胃癌细胞STAT 3 Mrna和蛋白表达的影响; MTT比色法检测细胞的生长抑制率; 采用流式细胞术检测转染后对MKN-45细胞凋亡的影响; 采用Boyden小室侵袭实验检测转染后MKN-45细胞侵袭力的变化.结果 成功转染重组体的MKN-45细胞中STAT 3 Mrna和蛋白表达明显下降(P<0.05).psiRNA-H1/STAT 3转染组各时相均明显抑制MKN-45细胞生长,且MKN-45细胞凋亡率为34.26%,相比对照组(3.75%)和psiRNA-H1转染组(4.43%)明显升高(P<0.01).另外,psiRNA-H1/STAT 3转染组MKN-45细胞侵袭力较另外2组明显减弱(P<0.01).结论 成功构建了针对STAT 3基因的shRNA表达载体,通过转染MKN-45细胞,在体外能有效抑制人胃癌细胞STAT 3 Mrna和蛋白表达,细胞增殖、侵袭能力减弱并且促进细胞凋亡,为STAT 3基因靶向治疗提供一定的实验依据.

关 键 词:信号传导及转录活化因子3  短发夹RNA  胃癌  表达载体

Construction of shRNA Expression Vectors for STAT3 Gene and Its Inhibitory Effect on The Growth and Invasion of Gastric Cancer Cells
TONG Qiang,SHU Xiao-gang,LU Xiao-ming,XIAO Yong,NIU Yan-feng,LI Wei-yong,TAO Kai-xiong,WANG Guo-bin.Construction of shRNA Expression Vectors for STAT3 Gene and Its Inhibitory Effect on The Growth and Invasion of Gastric Cancer Cells[J].Chinese Journal of Bases and Clinics In General Surgery,2009,16(1).
Authors:TONG Qiang  SHU Xiao-gang  LU Xiao-ming  XIAO Yong  NIU Yan-feng  LI Wei-yong  TAO Kai-xiong  WANG Guo-bin
Abstract:
Keywords:
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