| Chitosan-DNA基因免疫诱导粘膜特异性免疫应答及其抗CVB3感染作用 |
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| 引用本文： | 徐薇,沈燕,王立新,许从峰,储以微,熊思东. Chitosan-DNA基因免疫诱导粘膜特异性免疫应答及其抗CVB3感染作用[J]. 中国免疫学杂志, 2003, 19(12): 813-817 |
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| 作者姓名： | 徐薇 沈燕 王立新 许从峰 储以微 熊思东 |
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| 作者单位： | 复旦大学上海医学院免疫学系,教育部分子医学重点实验室,上海基因免疫与疫苗研究中心,上海,200032 |
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| 基金项目： | 上海市科技发展基金 ( 99JC14 0 3 2 )，国家杰出青年科学基金(39925031)资助项目 |
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| 摘 要： | 目的：构建新型粘膜基因疫苗，诱生CVB3VP1特异性粘膜免疫应答，探讨粘膜免疫抗CVB3感染的作用，为病毒性心肌炎的特异性防治奠定基础。方法：抽提CVB3 RNA，以RT-PCR扩增得VP1基因，插入真核表达载体pcDNA3中，构建质粒pcDNA3-VP1，以Chitosan多糖包裹形成Chitosan-DNA基因疫苗。将该质粒转染Hela细胞，观察其体外表达情况。以50辉DNA剂量的Chitosan-DNA疫苗滴鼻免疫BALB／C小鼠3次，检测CVB3特异性体液和细胞免疫应答；隔4周以5LD50活CVB3致死攻击小鼠，观察攻击后存活情况。结果：制备了直径为80-100nm的Chitosan-DNA复合物颗粒，体外转染证实Chitosan-DNA复合物中VPl的表达高于pcDNA3-VP1质粒-Lipofectamine的表达水平。该疫苗滴鼻3次免疫后，不仅诱生了高水平的IgG，而且诱生了高水平的粘膜IgA抗体，第6周抗体P/N值分别达3．5和3．2。特异性细胞免疫应答研究发现，该疫苗诱生了较强的VP1特异性CTL杀伤作用，并显著高于pcDNA3-VP1和pcDNA3组。CVB3攻击后，可保护33．3％小鼠长期存活，而pcDNA3和pcDNA3-VP1质粒滴鼻免疫对照组的平均存活天数分别为8．5和10．8天。病理学研究显示：Chitosan-DNA免疫小鼠心肌组织基本正常，而对照小鼠死亡前心肌显示大量的灶性坏死和炎性浸润。结论：Chitosan-DNA基因疫苗滴鼻免疫可诱生CVB3特异性粘膜IgA应答及CTL反应，具有一定的抗CVB感染的免疫保护力。
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| 关 键 词： | CVB3 VP1 Chitosan-DNA疫苗 滴鼻 免疫保护 |
| 文章编号： | 1000-484X(2003)12-0813-05 |
Intranasal gene immunization with Chitosan-DNA vaccine generates mucosal IgA and protects BALB/C mice against CVB3 challenge |
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| XU Wei,SHEN Yan,WANG Li-Xin et al. Intranasal gene immunization with Chitosan-DNA vaccine generates mucosal IgA and protects BALB/C mice against CVB3 challenge[J]. Chinese Journal of Immunology, 2003, 19(12): 813-817 |
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| Authors: | XU Wei SHEN Yan WANG Li-Xin et al |
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| Affiliation: | XU Wei,SHEN Yan,WANG Li-Xin et al.Department of Immunology and Key Laboratory of Molecular Medicine of Ministry of Education,Shanghai Medical College of Fudan University,Center for Gene Immunization and Vaccine Research,Shanghai 200032,China |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Chitosan-DNA vaccine CVB3 VP1 Immunologic protection |
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