| pri-miR-21重组腺病毒载体构建及其对TLR4基因调控的研究 |
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| 引用本文： | 赵婧,徐广贤,贾伟,董辉,张一琳,赵志军,魏军.pri-miR-21重组腺病毒载体构建及其对TLR4基因调控的研究[J].细胞与分子免疫学杂志,2012,28(2):153-155,159. |
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| 作者姓名： | 赵婧 徐广贤 贾伟 董辉 张一琳 赵志军 魏军 |
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| 作者单位： | 赵婧 (宁夏医科大学 检验学院,宁夏银川,750004) ； 徐广贤 (宁夏医科大学 检验学院,宁夏银川750004) ； 贾伟 (宁夏医科大学 总医院医学实验中心,宁夏银川750004) ； 董辉 (宁夏医科大学 总医院医学实验中心,宁夏银川,750004) ； 张一琳 (宁夏大学西部特色生物资源保护与利用教育部重点实验室,宁夏银川,750021) ； 赵志军 (宁夏医科大学 检验学院,宁夏银川,750004) ； 魏军 (宁夏医科大学 总医院医学实验中心,宁夏银川,750004) ； |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金,宁夏自然基金,宁夏高等学校科学技术研究重点项目 |
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| 摘 要： | 目的:构建能高效表达成熟miR-21小分子的腺病毒载体,探讨其对TLR4基因的靶向调控关系。方法:以正常小鼠基因组DNA为模板,PCR扩增pri-miR-21基因,克隆至穿梭载体pAdTrack-CMV中经PCR、酶切及基因测序分析正确无误后,与pAdEasy-1腺病毒骨架质粒进行同源重组,并利用293A细胞,包装成pri-miR-21重组腺病毒感染HeLa细胞,通过Western blot检测TLR4的蛋白表达水平,验证miR-21与TLR4靶向调控的关系。结果:经PCR、酶切、测序及GFP表达证实,成功构建携带pri-miR-21基因的重组腺病毒载体并制备出高滴度重组病毒。Western blot证实,miR-21可抑制TLR4蛋白的表达。结论:所制备的小鼠pri-miR-21重组腺病毒,可以高效表达成熟miR-21小分子,能够抑制靶基因TLR4的表达。
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| 关 键 词： | pri-miR-21 重组腺病毒载体 TLR4基因 靶向调控 |
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