| 人PCK1基因克隆及其表达载体的构建 |
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| 引用本文： | 董艳,张宏利,冯绮文,陈雪茹,苏青.人PCK1基因克隆及其表达载体的构建[J].上海交通大学学报(医学版),2006,26(2). |
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| 作者姓名： | 董艳 张宏利 冯绮文 陈雪茹 苏青 |
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| 作者单位： | 1. 上海交通大学医学院新华医院内分泌科,上海,200092
2. 上海交通大学医学院瑞金医院内分泌代谢病科,上海市内分泌代谢病临床医学中心,上海市内分泌代谢病研究所,上海,200092 |
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| 摘 要： | 目的 构建人PCK1基因的真核表达载体.方法 以人内脏脂肪细胞cDNA为模板, 聚合酶链反应(PCR)扩增PCK1基因编码区的全部序列,克隆入pGEM-T载体中,经限制性内切酶、DNA序列分析鉴定目的基因后,定向亚克隆到真核细胞表达载体pcDNA3.1(+)中,并进行双酶切鉴定.结果 PCR扩增的特异性片段长度为1 972 bp,以此构建的pGEM-T-PCK1克隆载体,经限制性内切酶酶切证实载体中带有PCK1基因的目的片段,与GenBank中的人PCK1基因cDNA序列一致.重组质粒pcDNA3.1-PCK1经KpnⅠ/XbaⅠ双酶切后显示5.1 kb和 2 000 bp左右的2个条带,证明PCK1基因已成功克隆到了真核细胞表达载体pcDNA3.1(+) 中.结论 成功构建了野生型pcDNA3.1-PCK1重组真核表达载体.
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| 关 键 词： | PCK1基因 克隆 真核表达载体 |
Cloning of Human PCK1 Gene and Construction of Its Expression Vector |
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| DONG Yan,ZHANG Hong-li,FENG Qi-wen,CHEN Xue-ru,SU Qing.Cloning of Human PCK1 Gene and Construction of Its Expression Vector[J].Journal of Shanghai Jiaotong University:Medical Science,2006,26(2). |
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| Authors: | DONG Yan ZHANG Hong-li FENG Qi-wen CHEN Xue-ru SU Qing |
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