根尖牙乳头干细胞外泌体对舍格伦综合征小鼠治疗效果的实验研究

目的    探索根尖牙乳头干细胞来源的外泌体（exosomes derived from stem cells from apical papilla，SCAP-Exo）对舍格伦综合征（Sjögren syndrome，SS）小鼠的治疗效果。方法    酶消化法提取根尖牙乳头干细胞，超速离心法提取SCAP-Exo，并应用透射电镜、纳米颗粒跟踪技术及Western Blot进行鉴定。选择10周龄雌性健康ICR小鼠6只作为对照组；选择10周龄雌性NOD小鼠12只随机分为NOD组和SCAP-Exo组，每组6只。饲养2、4周后，SCAP-Exo组小鼠尾静脉注射SCAP-Exo，其他组小鼠尾静脉注射PBS。于饲养6周后检测各组小鼠唾液流率。随后收集小鼠外周血，流式细胞术检测外周血中辅助性T细胞17（T helper 17，Th17）/CD4+ T细胞比例，ELISA检测血清中白细胞介素-17A（interleukin-17A，IL-17A）表达水平。最终处死各组小鼠，通过HE染色观察下颌下腺中淋巴细胞浸润水平。结果    透射电镜下可见SCAP-Exo呈杯状的囊泡结构；纳米颗粒跟踪技术分析SCAP-Exo直径为30 ~ 150 nm；外泌体特异性标记蛋白CD9、Alix呈阳性表达，不表达细胞内质网特异性蛋白Calnexin。3组小鼠唾液流率、外周血Th17/CD4+ T细胞比例及IL-17A表达水平总的比较，差异均有统计学意义（F值分别为59.169、293.217、189.583，均P < 0.05）。其中，与对照组相比，NOD组小鼠唾液流率明显降低、外周血Th17/CD4+ T细胞比例及IL-17A表达水平明显升高；而相较于NOD组，SCAP-Exo组小鼠唾液流率明显增加、外周血Th17/CD4+ T细胞比例及IL-17A表达水平明显降低；差异均有统计学意义（均P < 0.05）。相较于NOD组，SCAP-Exo组小鼠下颌下腺淋巴细胞浸润水平显著降低，仅存在轻度散在的淋巴细胞浸润或出现极个别的淋巴细胞浸润灶。结论    SCAP-Exo能有效治疗SS小鼠，可能与其调节Th17细胞转化有关。