应用流式细胞仪和荧光原位杂交技术检测小鼠体内诱导的IL-1mRNA |
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作者姓名: | 朱华锋 |
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摘 要: | 文章介绍流式细胞仪(FC)和荧光原位杂交技术(FISH)联合运用,作为定量检测选择细胞群中特异性细胞因子mRNA水平的敏感方法.为了检测小鼠体内诱导的IL-1αmRNA,首先于BALB/C小鼠腹膜内注入20μgLPS,3小时后收集脾细胞和硫基乙醇诱导的腹腔渗出细胞.每组细胞标记大鼠抗小鼠巨噬细胞抗体(MAC)或IA~d.RNA-RNA FISH测定,将悬浮细胞与生物素化的有意义IL-1α探针,反义IL-1α和反义IL-2探针共同孵育37℃17小时.杂交细胞用RNA酶处理,异硫氰酸荧光素
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