双抗夹心化学发光免疫分析定量检测Ⅳ型胶原方法的建立 |
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作者姓名: | 徐军 侯俊 赵静 刘佳 王卫东 卞成蓉 戴亮 陈霖 刘爱霞 郭晓东 李伯安 |
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作者单位: | [1]解放军第三○二医院临检中心,北京100039 [2]解放军第三○二医院实验技术研究保障中心,北京100039 [3]解放军第三○二医院病理中心,北京100039 |
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摘 要: | 目的 建立基于双抗夹心微孔板化学发光酶免疫分析的人血清Ⅳ型胶原定量检测方法.方法 应用Ⅳ型胶原多抗进行包被,辣根过氧化物酶标记Ⅳ型胶原单抗,以鲁米诺化学发光体系检测,调整优化各种反应液的工作浓度和各类反应条件后建立双抗体夹心的检测方法;评价所建立方法的线性范围、特异性、灵敏度、稳定性等性能指标;应用肝纤维化患者血清与进口试剂进行比对实验.结果 所建立方法的灵敏度为15.5 ng/ml,线性范围25 ~ 850 ng/ml,批内、批间变异均小于8%.检测Ⅳ型胶原的临床高、中、低值血清回收率分别为98.5%、94.3%和102.6%;在4℃和37℃条件下分别进行了3、5、7d的稳定性考察,线性相关系数均>0.99,标准偏差<7%;比对实验分析显示与进口试剂相关性具有统计学意义.结论 成功建立了定量Ⅳ型胶原化学发光酶免疫分析方法,该方法有较好的准确性、灵敏度、重复性,与进口试剂检测结果等效.
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关 键 词: | 化学发光 酶多种免疫测定技术 胶原Ⅳ型 肝硬化 |
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