| 摘 要： | 作者在研究大白鼠肝脏化学致癌过程中,发现尿苷二磷酸葡萄糖醛酸基转移酶(UDP-GT)的分子形式有胚胎型变化。化学致癌剂2-甲基-胆蒽(3-MC)、二乙基亚硝酸胺(DEN)、2-乙酰氨基芴(FAA)以及抗氧化剂2,3-丁基-4-羟基苯甲醚(BHA)均能诱导炎 o-GT(以2-氨基苯酚作为底物的“胚胎型”UDP-GT),苯巴比妥则诱导 p-GT(以酚酞作为底物的“新生儿型”UDP-GT),在肝脏癌前病变(增生性结节)或在高分化型肝癌时,o-GT 活性显著升高,但在低分化型肝癌时o-GT 活性下降;p-GT 活性虽在癌前病变时有所增高,但在肝癌时,无论在高分化型或低分化型,其活性均下降。采用以氨基已烷基琼脂糖凝胶4B(Aminohexyl Sepharose 4B)为载体的疏水性层析法提纯以 DEN 处理的大白鼠肝脏 o-GT 和 p-GT,其纯化度分别为100倍和50倍,两者的回收率分别为17%和8%。用 SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳法所测得o-GT 和 p-GT 亚单位的分子量分别为54000和58000;用聚丙烯酰胺凝胶等电聚焦电泳法所测得的 o-GT 和 p-GT 的等电点分别为6.2和6.6。 0.05～0.1%Triton X-100对肝微粒体膜结合性 o-GT 有激活作用,但对纯化的该酶却有抑制作用。0.1～0.5%胆酸钠以及5～10mM DEN 无论是对肝微粒体膜结合性的 o-GT,还是对纯化的 o-GT 均有激活作用,但对 p-GT 均有抑制作用。DEN对 o-GT 活性的影响,主要表现在对 V_(max) 的增减上。用以 DEN 诱导产生的 UDP-GT 制成抗体,进行琼脂双向免疫扩散试验,结果o-GT 和 p-GT 之间形成了融合的沉淀线,但是用该抗体所做的酶活性抑制试验表明,o-GT 的抑制率高于 p-GT。在肝脏致癌过程中,胚胎型 UDP-GT的诱导可作为肝脏癌前病变或高分化型肝脏的生物化学标志,具有诊断价值,而且对化学致癌机理和抑癌机理的研究具有重要意义。
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