ECE2通过上调E2F1和MYC来促进乳腺癌细胞的增殖和迁移

目的　通过检测内皮素转化酶2（ECE2）在乳腺癌中的表达,探究其对乳腺癌细胞增殖、迁移的影响及潜在分子机制。方法　选取20 例临床乳腺癌组织及其对应癌旁正常组织样本,通过qRT-PCR 检测ECE2 基因在乳腺癌组织中的表达特征。通过siRNA 介导敲低ECE2 表达,利用细胞增殖实验、克隆形成实验、划痕迁移实验和细胞周期实验分别验证敲低ECE2 表达对乳腺癌细胞增殖、克隆形成、迁移及凋亡的影响。通过分析与ECE2 共表达基因参与的信号通路,探索ECE2 在乳腺癌发展进程中的潜在分子机制,进一步通过细胞增殖回补实验进行验证。结果　20 例临床乳腺癌组织中ECE2 表达较癌旁正常组织显著上调（30.342±6.564 vs 21.753±8.244）,差异有统计学意义（t=3.645,P=0.000）。转染敲低ECE2 表达后,siECE2#1 组和siECE2#2 组在24,48,72 h 的吸光度值较对照组明显降低,差异有统计学意义（F=71.409~211.681,均P ＜ 0.01）。siECE2#1 组（0.515±0.014）和siECE2#2 组（0.511±0.006）细胞克隆形成速率明显低于对照组（3.473±0.147）,差异有统计学意义（F=467.152,P ＜ 0.001）。siECE2#1 组（56.423±1.137）和siECE2#2 组（42.036±0.754）细胞迁移愈合速率显著低于对照组（78.124±1.352）,差异有统计学意义（F=805.162,P ＜ 0.001）。siECE2#1 组和siECE2#2 组细胞凋亡率较对照组明显降低,细胞周期显著阻滞在G1 期。siECE2#1 组和siECE2# 组细胞中E2F1 mRNA 和蛋白表达水平明显低于对照组,差异均有统计学意义（F=703.020,136.301,均P＜ 0.001）;MYC mRNA 和蛋白表达水平也明显低于对照组（F=613.395,102.573,均P ＜ 0.001）。在敲低ECE2 表达的乳腺癌细胞中分别回补E2F1 和MYC 后,细胞增殖速率回归至正常水平。结论　ECE2 高表达诱导促癌基因E2F1和MYC 的高表达进而促进乳腺癌细胞的增殖及迁移,阻碍细胞周期停滞在G1 期,参与乳腺癌的发展进程。

ECE2 Promotes Proliferation and Migration of Breast Cancer Cells byUpregulation of E2F1 and MYC