基于 Akt/mTOR 自噬通路介导 NLRP3 炎症小体失活探讨冲和膏促进糖尿病大鼠溃疡创面愈合的作用机制

目的 探讨冲和膏通过蛋白激酶 B （Akt） /哺乳动物雷帕霉素靶蛋白 （mTOR） 自噬通路介导核苷酸结合寡 聚酸结构域样受体蛋白 3 （NLRP3） 炎症小体失活对糖尿病大鼠溃疡创面愈合的作用机制。方法 采用高糖高脂 饲料喂养、腹腔注射链脲佐菌素 （Streptozocin，STZ） 联合皮肤缺损方法构建糖尿病溃疡 SD 大鼠创面模型 36 只，将大鼠随机分为模型组、冲和膏组和生长因子组，每组 12 只。另取 12 只 SD 大鼠构建普通创面模型作 为空白组。空白组和模型组不进行药物干预，冲和膏组和生长因子组分别外敷冲和膏、生长因子凝胶，观察记 录各组大鼠创面愈合情况。给药第 7 天和第 14 天分别取材，HE 染色观察创面组织病理学改变，并进行成纤 维细胞计数；ELISA 法检测血清中白细胞介素 （IL） -1β、IL-18、肿瘤坏死因子 （TNF） -α 水平；免疫组化检测 创面肉芽组织自噬相关蛋白 Beclin-1、LC3-Ⅱ表达水平；Western Blot 法检测创面肉芽组织炎症小体相关蛋白 NLRP3、含 Caspase 募集结构域的凋亡相关斑点样蛋白 （ASC） 、Caspase-1、Pro-Caspase-1 及 Akt/mTOR 自噬通 路相关蛋白 Akt、p-Akt、mTOR、p-mTOR 的表达情况。结果 与空白组比较，模型组在第 7 天和第 14 天创 面病理损伤修复延缓，单位面积成纤维细胞数量较少 （P＜0.01） ，炎症因子 IL-1β、IL-18、TNF-α 水平升高 （P＜0.01） ，创面组织中 ASC、Pro-Caspase-1、Caspase-1、NLRP3 表达水平升高 （P＜0.01） ，Beclin-1、LC3-Ⅱ 以及 mTOR、p-mTOR、Akt、p-Akt 表达水平降低 （P＜0.01） ；与模型组比，第 7 天和第 14 天冲和膏组和生长 因子组病理损伤明显改善，单位面积成纤维细胞数量明显增加 （P＜0.01） ，炎症因子 IL-1β、IL-18、TNF-α 水 平明显降低 （P＜0.01） ，创面组织中ASC、Pro-Caspase-1、Caspase-1、NLRP3表达水平降低 （P＜0.01） ，Beclin-1、 LC3-Ⅱ以及 mTOR、p-mTOR、Akt、p-Akt 表达水平升高 （P＜0.01，P＜0.05） 。结论 冲和膏可降低炎症反 应，促进成纤维细胞生成，调控 Akt/mTOR 通路介导 NLRP3 炎症小体失活，改善创面自噬水平，从而促进糖 尿病大鼠溃疡创面愈合。

Mechanism Study of Chonghe Soft Extract on Promoting Ulcer Wound Healing in Diabetes Rats Based on Akt-mTOR Autophagy-mediated NLRP3 Inflammasome Inactivation