BMP-2蛋白通过Smad途径对牙髓干细胞成牙本质分化的作用机制研究

目的：探讨骨形成蛋白2(Bone morphogenetic protein-2,BMP-2)对牙髓干细胞成牙本质分化的影响及对Smad1/5通路的调节作用。方法：取对数生长期的人牙髓干细胞，配制成密度为3×10⁴个/毫升的细胞悬液，接种于24孔板，置于培养箱中培养至细胞密度约为80%时，将细胞随机分为对照组、单纯诱导组和抑制剂组。对照组细胞不做任何处理，单纯诱导组细胞用浓度为100 ng/ml的BMP-2诱导液(BMP-2溶于DMEM培养基)培养，抑制剂组细胞先用200 nmol/L的Smad1/5抑制剂LDN-193189处理24 h后，更换为BMP-2诱导液，培养14 d后，CCK-8检测人牙髓干细胞活性、qRT-PCR检测牙本质基质蛋白1(DMP-1)和牙本质涎磷蛋白(DSPP)mRNA相对表达量、检测碱性磷酸酶(ALP)活性、茜素红染色观察矿化结节情况、蛋白印迹法检测BMP-2和p-Smad1/5蛋白相对表达量。结果：单纯诱导组矿化结节明显，抑制剂组矿化结节减少；与对照组比较，单纯诱导组牙髓干细胞活性、ALP活性增强，DMP-1和DSPP mRNA相对表...