| 结核分枝杆菌1hp-esat6融合基因原核表达载体的构建和表达 |
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| 引用本文： | 陈全,朱道银,骆旭东,蒋英,江山.结核分枝杆菌1hp-esat6融合基因原核表达载体的构建和表达[J].重庆医科大学学报,2003,28(3):284-287,333. |
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| 作者姓名： | 陈全 朱道银 骆旭东 蒋英 江山 |
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| 作者单位： | 重庆医科大学基础医学院微生物学教研室,重庆,400016 |
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| 摘 要： | 目的：构建结核分枝杆菌(MTb)1hp—esat6融合基因及其原核表达载体并进行表达。方法：用Gene SOEing法，将1hp基因和esat6基因体外重组，构建融合基因，克隆入pQE30质粒中进行表达。结果：构建的融合基因经测序证实完全正确，重组体转化表达菌DH5α后，经过IPTG诱导，表达出26kDa左右的CFP10-ESAT6融合蛋白。SDS—PAGE分析显示，IPTG诱导4h表达量最高，表达蛋白以可溶性非包涵体形式存在于胞浆中，表达量占全菌蛋白质的40％，Western blotting证实其有良好的抗原性。表达蛋白经过Ni—NTA柱纯化后，获得了纯度为98%的重组蛋白。结论：成功构建MTb 1hp—esat6融合基因，成功构建原核表达载体pQE30-CFP10-ESAT6，并获得重组CFP10-ESAT6融合蛋白，为MTb重组抗原的应用奠定了基础。
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| 关 键 词： | 结核分枝杆菌 1hp—esat6融合基因 重组CFP10一ESAT6 原核表达 |
| 文章编号： | 0253-3626(2003)03-0284-04 |
Construction and expression of the prokaryotic expression vector of MTb Ihp-esat6 fusion gene |
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