| 大鼠椭圆囊感觉上皮细胞的原代培养及其意义 |
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| 引用本文： | 刘俊,孔维佳,张丹,张亚民. 大鼠椭圆囊感觉上皮细胞的原代培养及其意义[J]. 中华耳科学杂志, 2006, 4(2): 123-128 |
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| 作者姓名： | 刘俊 孔维佳 张丹 张亚民 |
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| 作者单位： | 武汉华中科技大学同济医学院附属协和医院耳鼻喉科,武汉,430022 |
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| 基金项目： | 国家高技术研究发展计划(863计划);教育部高校骨干教师资助计划;高等学校博士学科点专项科研项目;科技部专项基金 |
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| 摘 要： | 目的建立大鼠椭圆囊感觉上皮细胞（utricular sensory epithelial cell，USEC）的原代培养体系，为研究毛细胞再生机制提供大量来源一致的细胞。方法取出生1天（postnatal dayl，P1）大鼠的椭圆囊感觉上皮，嗜热菌蛋白酶（thermolysin）消化处理，获得纯椭圆囊感觉上皮。再采用消化法进行原代培养，培养基为DMEM。从第2天开始每日用倒置显微镜观察、照相，对USEC的形态、生长特征进行观察；透射电镜观察；应用细胞角蛋白18及波形蛋白免疫细胞化学方法鉴定USEC来源：应用免疫细胞化学及RT—PCR分别检测毛细胞的特征性标志物calretinin、Brn3．a和AChR α9、myosin Ⅶa mRNA的表达。结果原代培养USEC呈扁平、多角形、核大而圆的上皮细胞形态。细胞之间连接紧密，形成单层时呈“铺路石样”外观，可见由成百个USEC包绕液体而成的dome。原代USEC表达细胞角蛋白，不表达波形蛋白，微绒毛丰富，细胞间连接紧密，提示其上皮起源；表达毛细胞的特征性标志物Bin3．a、calretinin及AchR α9、myosin Ⅶa mRNA，表明培养USEC具有毛细胞前体细胞的特征。结论原代培养的USEC表达毛细胞的特征性标志物，具有毛细胞前体细胞的特征。USEC原代培养体系的建立。为进一步探讨毛细胞再生的机制提供充足的细胞来源。
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| 关 键 词： | 椭圆囊 感觉上皮 原代培养 再生 毛细胞 |
| 文章编号： | 1672-2922（2006）02-0123-06 |
| 收稿时间： | 2005-01-20 |
| 修稿时间： | 2005-01-20 |
Establishment and characterization of primary culture of rat utricular sensory epithelial cells |
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| LIU Jun,KONG Wei-jia,ZHANG Dan,ZHANG Ya-min. Establishment and characterization of primary culture of rat utricular sensory epithelial cells[J]. Chinese Journal of Otology, 2006, 4(2): 123-128 |
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| Authors: | LIU Jun KONG Wei-jia ZHANG Dan ZHANG Ya-min |
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| Affiliation: | Department of Otolaryngology, Union Hospital, Tongji Medical College, Huozhong University of Science and Technology, Wuhan 430022, China |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Utricule Sensory epithelia Primary culture Regeneration Hair cells |
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