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人血管内皮生长因子C基因真核表达载体的构建
引用本文:刘执玉,高杰,房云海,董平,李贵宝,宋涛. 人血管内皮生长因子C基因真核表达载体的构建[J]. 中国现代普通外科进展, 2002, 5(4): 220-224
作者姓名:刘执玉  高杰  房云海  董平  李贵宝  宋涛
作者单位:DepartmentofHumanAnatomy,SchoolofMedicine,ShandongUniversity(jinan250012,china))
摘    要:目的:VEGF—C基因的真核表达载体,以便进一步研究VEGF—C基因在淋巴管生成中的作用。方法:根据人VEGF—C的cDNA序列,设计合成一对5’端分别含有EcoRI和BamH I酶切位点的特异性引物,运用RT—RCR方法扩塔人乳腺癌细胞MDA—MB-231中的VEGF—C cDNA(1.26kb);回收PCR产物(1.28kb),并将其连接至克隆载体pUMT—18中,重组的pUMT—18在大肠杆菌DH5α内扩增后,经质粒提取、EcoR I和BamH I酶切,筛选出阳性重组子,并进行基因测序鉴定;琼脂糖凝胶电泳回收含有VEGF—C cDNA全长的酶切片断(1.27kb),然后在DNA连接酶作用下将其与真核表达载体pcDNA3.1(-)连接,重组质粒经EcoR I和BamH I酶切予以鉴定。结果:RT—PCR产物自有VEGF-C cDNA,基因测序显示重组的pUMT—18中自有正确的人VEGF—C cDNA全长序列,重组的pcDNA3.1(-)中含有人VEGF—C cDNA全长序列。结论:VEGP—C/pcDNA3.1(-)。

关 键 词:血管内皮生长因子 载体蛋白质 基因表达 VEGF—C基因

Construction of eukaryotic expression vector for human vascular endothelial growth factor C gene
LIU Zhi yu,GAO Jie,FANG Yun hai,DONG Ping,LI Gui bao,SONG Tao. Construction of eukaryotic expression vector for human vascular endothelial growth factor C gene[J]. Chinese Journal of Current Advances in General Surgery, 2002, 5(4): 220-224
Authors:LIU Zhi yu  GAO Jie  FANG Yun hai  DONG Ping  LI Gui bao  SONG Tao
Affiliation:Department of Human Anatomy,School of Medicine,Shandong University,Jinan 250012,China
Abstract:
Keywords:Vascular endothelial growth factor C  Carrier proteins  Gene expression
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