摘 要: | 系统比较分析不同生长年限下仿野生与平栽蒙古黄芪中黄芪甲苷的含量差异及其生物合成相关基因的表达情况,筛选出影响上述黄芪甲苷含量差异的关键酶基因。采用高效液相色谱(HPLC)进行黄芪甲苷含量测定;基于Illumina HiSeq和PacBio高通量转录组测序已构建的蒙古黄芪转录组数据库(RNA-Seq),筛选出与上述黄芪甲苷含量差异相关的酶基因,进行荧光定量PCR(RT-qPCR)验证,并对相关酶基因的RNA-Seq与RT-qPCR结果进行相关分析和趋势分析。发现一至四年生仿野生黄芪(IWA)与一至二年生平栽黄芪(CA)中黄芪甲苷含量变化趋势与RNA-Seq、RT-qPCR基因变化趋势相同,其中二年生IWA较一年生呈下降趋势,三年生IWA较二年生呈上升趋势,四年生IWA较三年生呈下降趋势,且一年生CA高于二年生。另五年生IWA的黄芪甲苷含量高于六年生,与RNA-Seq、RT-qPCR结果不同。该文初步阐明一至四年生IWA与一至二年生CA的黄芪甲苷含量差异与其合成途径中的上中游基因(MVK、CMK、PMK、MVD、SS)紧密相关,该结果将对黄芪药材生产种植实践有积极的指导意义。
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