cGAS促进HTLV-1反转中间体ssDNA90诱导的固有免疫应答北大核心CSCD |
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引用本文: | 郭志祥,宋迪,刘月,崔钰晗,马玲玲,关宇鹤,杨波,王洁.cGAS促进HTLV-1反转中间体ssDNA90诱导的固有免疫应答北大核心CSCD[J].中华微生物学和免疫学杂志,2018(6):434-439. |
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作者姓名: | 郭志祥 宋迪 刘月 崔钰晗 马玲玲 关宇鹤 杨波 王洁 |
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作者单位: | 1.新乡医学院河南省免疫与靶向药物重点实验室453003;2.新乡医学院医学检验学院科研创新班453003;3.新乡医学院河南省分子诊断与医学检验技术协同创新中心453003; |
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基金项目: | 国家自然科学基金(U1504811,31600697,U1704183);河南省高等学校重点科研项目计划(16A31003);国家大学生创新创业实践计划(201710472015);新乡医学院研究生创新基地 |
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摘 要: | 目的探讨DNA识别受体环鸟苷酸-腺苷酸合成酶(cGAS)在成人T淋巴细胞白血病病毒1型(HTLV-1)的反转中间体诱导的固有免疫信号通路中的调控功能。方法将HTLV-1的反转中间体ssDNA90转染入HeLa细胞,采用免疫印迹试验检测cGAS在HeLa细胞中的表达变化;将cGAS表达质粒,转染入HeLa细胞,24 h后再转染入ssDNA90,real-time PCR试验检测HeLa细胞中干扰素(IFN)-β、干扰素诱导蛋白10(IP-10)、调节活化正常T细胞表达和趋化因子(RANTES)和肿瘤坏死因子(TNF)-α的表达,免疫印迹试验检测HeLa细胞中干扰素调节因子3(IRF3)和p65的磷酸化水平;采用siRNA的方法在HeLa和佛波酯(phorbol-12-myristate-13-acetate,PMA)诱导分化的THP1(PMA-THP1)细胞中沉默cGAS的表达,24 h后再转染入ssDNA90,real-time PCR试验检测HeLa和PMA-THP1细胞中IFN-β、IP-10、RANTES和TNF-α的表达,免疫印迹试验检测HeLa和PMA-THP1细胞中IRF3和p65的磷酸化水平。结果ssDNA90转染后,HeLa细胞中cGAS的表达升高;转染有cGAS表达质粒的HeLa细胞与对照组细胞相比,在ssDNA90刺激后,IFN-β、IP-10、RANTES和TNF-α的表达量增加,IRF3和p65的磷酸化水平升高;沉默cGAS表达的HeLa和PMA-THP1细胞与对照组细胞相比,在ssDNA90刺激后,IFN-β、IP-10、RANTES和TNF-α的表达量降低,IRF3和p65的磷酸化水平下降。结论cGAS在HTLV-1的反转中间体ssDNA90诱导的固有免疫应答中可能具有促进功能。
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关 键 词: | 环鸟苷酸-腺苷酸合成酶 成人T淋巴细胞白血病病毒1型 DNA识别受体 反转中间体 固有免疫应答 |
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