| 摘 要： | 基于“阴静阳躁”理论观察熟地黄对注意缺陷多动障碍(attentional deficit hyperactivity disorder,ADHD)模型幼龄自发性高血压病大鼠(spontaneously hypertensive rats,SHR)前额叶皮质(prefrontal cortex,PFC)能量代谢及其调控机制的影响。将30只3周龄雄性SHR随机分为模型组、哌醋甲酯(methylphenidate,MPH)组、熟地黄组,同周龄京都(Wistar-Kyoto,WKY)雄性大鼠为正常组,每组10只;正常组、模型组予同体积0.9%羧甲基纤维素钠(sodium carboxymethyl cellulose,CMC-Na)溶液灌胃,MPH组、熟地黄组分别予MPH(2 mg·kg^(-1))、熟地黄(2.4 g·kg^(-1))灌胃,每日2次。给药前、给药第4周时分别采用开场实验评估大鼠自发性行为。给药4周后,分离PFC制备线粒体,采用高效液相色谱法(high performance liquid chromatography,HPLC)测定PFC中三磷酸腺苷(adenosine triphosphate,ATP)、二磷酸腺苷(adenosine diphosphate,ADP)、一磷酸腺苷(adenosine monophosphate,AMP)水平,计算能荷(energy charge,EC)值;Clark氧电极法测定线粒体呼吸功能相关参数:Ⅲ态呼吸(state 3 respiration,ST3)、Ⅳ态呼吸(state 4 respiration,ST4)与呼吸控制指数(respiratory control rate,RCR);化学比色法测定线粒体琥珀酸脱氢酶(succinate dehydrogenase,SDH)、细胞色素C氧化酶(cytochrome C oxidase,COX)、Na^(+)-K^(+)-ATP酶、Ca^(2+)-Mg^(2+)-ATP酶活性;采用分光光度法测定线粒体膜通透性转换孔(mitochondrial permeability transition pore,mPTP)开放程度;蛋白免疫印迹(Western blot)法检测PFC中葡萄糖转运蛋白(glucose transporter,GLUT)1和GLUT3的表达水平。结果显示,与模型组相比,熟地黄可以显著降低SHR大鼠在开场实验中的总运动距离、直立次数及中心区域运动距离(P<0.05或P<0.01),升高大鼠脑组织ATP及EC水平、降低AMP水平(P<0.05),升高ST3耗氧率、RCR(P<0.05),明显升高SDH、COX、Na^(+)-K^(+)-ATP酶和Ca^(2+)-Mg^(2+)-ATP酶活性(P<0.05或P<0.01),抑制mPTP开放,提高GLUT1及GLUT3蛋白表达水平(P<0.05)。推测熟地黄可能通过改善ADHD模型大鼠PFC存在的能量代谢障碍而抑制其多动、冲动,其机制可能与改善线粒体呼吸功能,提高Na^(+)-K^(+)-ATP酶、Ca^(2+)-Mg^(2+)-ATP酶及线粒体呼吸酶活性,抑制mPTP开放,提高葡萄糖转运蛋白表达有关,初步揭示了ADHD“阴静阳躁”理论的现代生物学内涵。
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