| 摘 要： | 目的探讨重组人促红细胞生成素(rhEPO)对大鼠肝脏缺血/再灌注损伤(IRI)的保护作用和机制。方法选取健康雄性Sprague-Dawley(SD)大鼠30只,随机均分为实验组(rhEPO组)、对照组及假手术组。rh EPO组术前1小时通过尾静脉注射5 000 U/kg的rhEPO,然后建立大鼠70%肝脏IRI模型。苏木素-伊红(HE)染色观察肝脏组织学变化;生化仪测定血清中天冬氨酸转氨酶(AST)和丙氨酸转氨酶(ALT)的释放量;蛋白免疫印迹试验(Western Blot)检测PI3K/AKT蛋白磷酸化水平;qPCR测定炎性细胞因子[肿瘤坏死因子(TNF-α)、白细胞介素(IL-6和IL-1β)] mRNA的表达;酶联免疫吸附试验(ELISA)测定血清中TNF-α、IL-6和IL-1β浓度。结果对照组有明显的肝组织损伤,血清中AST和ALT释放量均增加,而rhEPO组肝组织损伤程度较轻,转氨酶水平低于对照组[AST(U/L):582.0±52.5比245.0±31.7; ALT(U/L):388.0±39.6比166.0±24.3,均P <0.05]。蛋白检测发现rhEPO组p-p85和p-AKT的表达显著增加,明显高于对照组。qPCR提示rhEPO组炎性因子TNF-α、IL-6和IL-1βmRNA表达明显低于对照组。ELISA亦证实rhEPO组血清中TNF-α、IL-6和IL-1β分泌低于对照组[TNF-α(pg/ml):425.0±31.2比227.0±19.7;IL-6(pg/ml):353.0±26.4比189.0±16.3;IL-1β(pg/ml):511.0±39.6比328.0±23.2,均P <0.05]。结论 rhEPO预处理能抑制大鼠肝脏IRI时炎性因子释放,保护肝组织,其机制可能与PI3K/AKT信号的进一步活化有关。
|
