| 腺病毒载体介导CagA基因表达对原代胃癌细胞糖酵解代谢酶表达的影响北大核心CSCD |
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| 引用本文： | 杨丽萍,贾岑岑,龙妮娅,骆梅,杨丹,王珺,谢渊,赵艳,王琴容,周建奖.腺病毒载体介导CagA基因表达对原代胃癌细胞糖酵解代谢酶表达的影响北大核心CSCD[J].中国病原生物学杂志,2019(11):1297-1302. |
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| 作者姓名： | 杨丽萍 贾岑岑 龙妮娅 骆梅 杨丹 王珺 谢渊 赵艳 王琴容 周建奖 |
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| 作者单位： | 1.贵州医科大学地方病与少数民族疾病教育部重点实验室550004;2.贵州医科大学分子生物学重点实验室;;3.贵州医科大学附属医院临床医学研究中心;;4.贵州医科大学附属医院临检科; |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金项目(No.31560326,31660031)；贵州省科技厅黔科合平台人才项目[2017]5652；贵州市科技局筑科合同项目[2017]5-16；贵州省卫计委科技基金项目(No.gzwjkj2015-1-010) |
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| 摘 要： | 目的研究过表达CagA对原代胃癌细胞糖酵解代谢酶表达的影响。方法构建CagA重组腺病毒载体pAdeno-MCMV-CagA-3Flag-IRES2-EGFP(pAdeno-CagA),转染HEK293细胞,包装腺病毒,以感染复数(Multiplicity of infection, MOI) 50感染原代胃癌细胞72 h,并用幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,Hp)东亚株GZ7(CagA^+)以MOI 50感染原代胃癌细胞24 h,通过Western blot检测CagA和已糖激酶2(HK2)、葡萄糖转运蛋白1(GLUT1)、烯醇化酶1(ENO1)、丙酮酸激酶1/2(PKM1/2)、乳酸脱氢酶A(LDHA)糖酵解代谢酶的蛋白表达,采用流式细胞术检测胃癌细胞周期分布。结果成功构建了CagA重组腺病毒载体pAdeno-CagA,用pAdeno-CagA腺病毒和Hp GZ7感染原代胃癌细胞后糖酵解代谢酶HK2、ENO1、GLUT1的表达与空载组或Hp非感染组比较均显著下调(P<0.05)。与空载组比较,pAdeno-CagA感染胃癌SGC-7901细胞24、48、72 h,其G2/M期细胞百分比显著增加(P<0.05),感染72 h的空载组和CagA腺病毒组G2/M期的比值分别为16.90%和65.93%。结论 Hp通过CagA使原代胃癌细胞糖酵解代谢酶表达下调,可能与DNA损伤使细胞阻滞在G2/M期有关。
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| 关 键 词： | 幽门螺杆菌 腺病毒 CagA 胃癌 糖酵解 细胞周期 |
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