| PTD-NGF融合蛋白的制备、活性分析及其跨膜功能研究 |
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| 引用本文： | 李仁德,王园园,王金凤,蔡欣,邹民吉,刘中成,周磊磊,邢微微,龙民慧,王嘉玺,徐东刚. PTD-NGF融合蛋白的制备、活性分析及其跨膜功能研究[J]. 军事医学科学院院刊, 2008, 32(3) |
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| 作者姓名： | 李仁德 王园园 王金凤 蔡欣 邹民吉 刘中成 周磊磊 邢微微 龙民慧 王嘉玺 徐东刚 |
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| 作者单位： | 军事医学科学院基础医学研究所,北京,100850 |
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| 摘 要： | 目的:构建PTD-NGF融合基因,检测表达的重组蛋白生物学活性和跨膜转运功能.方法:提取小鼠大脑组织RNA逆转录后,钓取β-NGF基因.PCR技术构建PTD-NGF融合基因,插入表达质粒pBV220后,转化大肠杆菌DH5α进行表达与纯化.稀释法复性后,SDS-PAGE及Western印迹鉴定表达重组蛋白.PC12细胞分化培养检测融合蛋白的生物学活性.重组蛋白与HepG2细胞共孵育,免疫组化检测其跨膜功能.结果:PTD-NGF融合基因测序正确,表达产物与目的蛋白大小相符,能与NGF抗体发生结合反应.纯化后蛋白纯度可约达90%以上,重组蛋白经复性可诱导PC12细胞出现明显分化,并能跨膜进入HepG2细胞内部.结论:成功构建了融合基因,表达的重组蛋白具有显著的生物学活性及跨膜转运功能.
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| 关 键 词： | 蛋白转导结构域 神经生长因子 基因表达 跨膜转运 基因融合 |
Preparation,bio-assay and transmembrane ability of PTD-NGF fusion protein |
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| LI Ren-De,WANG Yuan-Yuan,WANG Jin-Feng,CAI Xin,ZOU Min-Ji,LIU Zhong-Cheng,ZHOU Lei-Lei,XING Wei-Wei,LONG Min-Hui,WANG Jia-Xi,XU Dong-Gang. Preparation,bio-assay and transmembrane ability of PTD-NGF fusion protein[J]. Bulletin of the Academy of Military Medical Sciences, 2008, 32(3) |
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| Authors: | LI Ren-De WANG Yuan-Yuan WANG Jin-Feng CAI Xin ZOU Min-Ji LIU Zhong-Cheng ZHOU Lei-Lei XING Wei-Wei LONG Min-Hui WANG Jia-Xi XU Dong-Gang |
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| Affiliation: | LI Ren-De,WANG Yuan-Yuan,WANG Jin-Feng,CAI Xin,ZOU Min-Ji,LIU Zhong-Cheng,ZHOU Lei-Lei,XING Wei-Wei,LONG Min-Hui,WANG Jia-Xi,XU Dong-Gang(Institute of Basic Medical Sciences,Academy of Military Medical Sciences,Beijing 100850,China) |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | protein transduction domain nerve growth factor gene expression transmembrane transport gene fusion |
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