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| 人CDK7基因真核表达载体的构建与鉴定 | |
| 引用本文： | 冀全博,徐小洁,张强,梁迎春,王涛,李玲,黄蓉,周丽英,史平安,王岩,叶棋浓. 人CDK7基因真核表达载体的构建与鉴定[J]. 军事医学科学院院刊, 2014, 0(12) |
| 作者姓名： | 冀全博 徐小洁 张强 梁迎春 王涛 李玲 黄蓉 周丽英 史平安 王岩 叶棋浓 |
| 作者单位： | 1. 军事医学科学院生物工程研究所，北京 100850; 解放军总医院骨科，北京 100853 2. 军事医学科学院生物工程研究所,北京,100850 3. 解放军总医院骨科,北京,100853 |
| 基金项目： | 国家自然科学基金资助项目(31100604，81101387)；北京市自然科学基金资助项目 |
| 摘 要： | 目的：构建带Myc标签的细胞周期蛋白依赖性激酶7（cyclin－dependent kinase 7， CDK7）的真核表达载体，获得其表达产物，并验证该激酶与已知相互作用蛋白P53之间的相互作用。方法应用PCR技术从人乳腺文库中扩增出CDK7全长编码区基因，将其克隆到pXJ－40载体中；继而重组质粒转染人胚肾293 T细胞，以SDS－PAGE和Western印迹鉴定表达情况；免疫共沉淀检测Myc－CDK7与FLAG－p53的相互作用。结果双酶切和基因测序鉴定显示，Myc－CDK7真核表达质粒克隆构建成功；SDS－PAGE和Western印迹结果表明，Myc－CDK7转染人胚肾293T细胞后成功表达；免疫共沉淀显示，重组Myc－CDK7与已知相互作用蛋白P53在蛋白质水平上具有相互作用，证实其具有生物学活性。结论成功构建Myc－CDK7的真核表达载体，为进一步探讨Myc－CDK7对细胞周期的调控奠定了实验基础。 |
| 关 键 词： | 细胞周期蛋白质依赖激酶类 基因,p53 真核表达 |
Construction and identification of plasmid vector of CDK7 |
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| JI Quan-bo,XU Xiao-jie,ZHANG Qiang,LIANG Ying-chun,WANG Tao,LI Ling,HUANG Rong,ZHOU Li-ying,SHI Ping-an,WANG Yan,YE Qi-nong. Construction and identification of plasmid vector of CDK7[J]. Bulletin of the Academy of Military Medical Sciences, 2014, 0(12) | |
| Authors: | JI Quan-bo XU Xiao-jie ZHANG Qiang LIANG Ying-chun WANG Tao LI Ling HUANG Rong ZHOU Li-ying SHI Ping-an WANG Yan YE Qi-nong |
| Abstract: | |
| Keywords: | cyclin-dependent kinases genes,p53 eukaryotic expression |
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