心脏基因工程研究对一级康复的干预作用：构建柯萨奇B2病毒毒粒蛋白候选基因疫苗诱导体液免疫的评估

目的：探讨心脏基因工程研究中构建柯萨奇B2病毒毒粒蛋白侯选基因疫苗，并评价其诱导体液免疫的效果：方法：实验于2003—05／12在中国农业科学院国家生物重点实验室哈尔滨兽医研究所生物二室完成。采用反转录聚合酶链反应技术扩增柯萨奇B2病毒的主要中和抗原毒粒蛋白基因，通过分子克隆构建pcDNA3-柯萨奇B2病毒毒粒蛋白基因免疫质粒。选择3周龄BALB／c雄性小鼠30只，随机分成3组，pcDNA3-柯萨奇B2病毒毒粒蛋白组：对小鼠进行pcDNA3-柯萨奇B2病毒毒粒蛋白免疫；空载体对照组对小鼠进行pcDNA3免疫；磷酸盐缓冲液组：对小鼠进行磷酸盐缓冲液免疫，每组10只。每组免疫时间和接种量、接种方法相同。采用酶联免疫吸附法测定pcDNA3．柯萨奇B2病毒毒粒蛋白、pcDNA3、磷酸盐缓冲液免疫小鼠后2，4，6，8周柯萨奇B2病毒特异性抗体免疫球蛋白C水平。结果：①获得pcDNA3-柯萨奇B2病毒毒粒蛋白基因免疫质粒，可在HeLa细胞中表达。②免疫后6，8周pcDNA3-柯萨奇B2病毒毒粒蛋白组柯萨奇B2病毒特异性抗体免疫球蛋白G水平明显高于免疫后4周似4靠0．153&;#177;0．013，0．150&;#177;0．011，0．142&;#177;0．014，P〈0．01，0．05）；免疫后4周pcDNA3-柯萨奇B2病毒毒粒蛋白组柯萨奇B2病毒特异性抗体免疫球蛋白G水平明显高于空载体对照组和磷酸盐缓冲液组（0．120&;#177;0．007，0．119&;#177;0．009．P〈0.011。结论：pcDNA3-柯萨奇B2病毒毒粒蛋白可诱导小鼠产生体液免疫，做为候选基因疫苗，以基因免疫的角度参与心脏基因工程研究．有望为该病毒性心肌炎的发生起到一级预防作用。