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HPLC法检测人红细胞中巯嘌呤甲基转移酶的活性
引用本文:熊晖,熊磊,苏丹,辛华雯,吴笑春,李罄,李高. HPLC法检测人红细胞中巯嘌呤甲基转移酶的活性[J]. 中国药师, 2007, 10(8): 738-740
作者姓名:熊晖  熊磊  苏丹  辛华雯  吴笑春  李罄  李高
作者单位:1. 华中科技大学同济医学院药学院,武汉,430030;广州军区武汉总医院临床药理科
2. 广州军区武汉总医院临床药理科
3. 华中科技大学同济医学院药学院,武汉,430030
基金项目:全军科学技术研究计划课题
摘    要:目的:建立一种测定巯嘌呤甲基转移酶(TPMT)活性的高效液相色谱法。方法:以S-甲基-14C-腺苷-甲硫氨酸(SAM)作为甲基供体,6-硫鸟嘌呤(6-TG)作为反应底物,TPMT催化6-TG生成6-甲基硫鸟嘌呤(6-MTG),高氯酸沉淀后进样分析。采用Hypersil BDS C18(250mm×4.6 mm,5μm)柱;流动相为磷酸钾缓冲液-乙腈-四氢呋喃(94:4:2),流速1ml·min-1;荧光检测器激发波长:315 nm,发射波长:390 nm。结果:标准曲线方程为Y=0.093 3X-0.002 2,r=0.999 3,线性范围为7.5~300.0 pmol。日内RSD小于5.0%,日间RSD小于13.0%,高、中、低浓度的平均方法回收率分别为94.42%,99.90%,103.94%,平均提取回收率分别为94.42%,81.85%,91.62%。结论:该法操作简便,回收率稳定,灵敏度高,适于临床常规检测。

关 键 词:巯嘌呤甲基转移酶  活性  高效液相色谱  荧光检测
文章编号:1008-049X(2007)08-0738-03
修稿时间:2007-01-09

Detection of Thiopurine Methyltransferase Activity in Human Red Cells by HPLC
Xiong Hui,Xiong Lei,Su Dan,Xin Huawen,Wu Xiaochun,Li Qing,Li Gao. Detection of Thiopurine Methyltransferase Activity in Human Red Cells by HPLC[J]. China Pharmacist, 2007, 10(8): 738-740
Authors:Xiong Hui  Xiong Lei  Su Dan  Xin Huawen  Wu Xiaochun  Li Qing  Li Gao
Affiliation:1. Tongji Pharmaceutical College, Huazhong Univeresity of Science and Technelogy, Wuhan 430030, China; 2. Department of Clinical Pharmacology, Wuhan General Hospital of Guangzhou Command
Abstract:
Keywords:Thiopurine methyltransferase  Activity  HPLC  Fluorometric
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