乙型肝炎核心抗原为载体进行丙型肝炎混合性治疗疫苗的实验

目的 以HBcAg为载体进行丙型肝炎混合性治疗疫苗的实验研究。方法 利用DNA重组技术将HCVT表位（131～140位氨基酸）和（1445～1453位氨基酸）分别插入HBcAg el—loop处，构建病毒颗粒样抗原表达载体pTrc-core-T1和pTrc-core-T2，并在大肠埃希菌DH5α中表达，蔗糖密度梯度离心提取纯化表达产物HBcAg—T1和HBcAg—T2。以T1和T2表位肽混合物、HBcAg—T1和HBcAg-T2混合蛋白免疫Balb／C小鼠，并设空白对照，适时行抑瘤实验；流式细胞仪检测CD4^＋、CD8^＋、IL-4及IFN-γ、IL-5，ELISA法检测IL-12；并行细胞杀伤实验，以观察混合蛋白的免疫原性。结果 PCR法鉴定质粒pTrc—core—T1和pTrc—core—T2正确。抑瘤实验中HBcAg—T1和HBcAg—T2混合蛋白免疫组仅1只小鼠形成瘤块，直径0．1cm，低于对照组的平均直径1．3cm、T1T2混合肽免疫组的0．9cm；混合蛋白免疫组脾细胞内CD8^＋T细胞占（20．21±2．01）％，高于混合肽免疫组的（15．33±1．45）％和空白对照组的（5．09±1．66）％（P〈0．01）；3组内脾细胞内IFN-γ阳性细胞百分比分别为（1．58±0．05）％、（0．88±0．02）％和（0．53±0．03）％（P〈0．01）；血清中IL-5较混合表位肽组有所下降（P〈0．01）；而ELISA检测混合蛋白组IL-12高于T1T2混合表位肽免疫组；混合蛋白免疫组小鼠HCV特异细胞毒性T淋巴细胞（CTL）活性明显高于T1T2混合表位肽免疫组（P〈0．01）。结论 HBcA乎T1和HBcAg～T2混合蛋白诱导出高水平的细胞免疫应答，可作为HCV治疗性疫苗的候选。

Development of hepatitis virus C therapeutic vaccine with hepatitis virus B core antigen as the carrier