基于COⅠ基因的媒介蝇类快速分子鉴定研究 |
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引用本文: | 王颖,;鲁闽,;李金庆,;刘明杰,;岳巧云.基于COⅠ基因的媒介蝇类快速分子鉴定研究[J].中国媒介生物学及控制杂志,2014(5):427-431. |
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作者姓名: | 王颖 ;鲁闽 ;李金庆 ;刘明杰 ;岳巧云 |
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作者单位: | [1]烟台出入境检验检疫局技术中心,山东烟台264000; [2]中山出入境检验检疫局,山东烟台264000; |
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基金项目: | 国家科技支撑计划课题(2012BAK11B05);国家质检总局科研基金(2012IK223);山东出入境检验检疫局科研基金(SK201116) |
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摘 要: | 目的 为解决蝇类形态学鉴定的不足,建立基于细胞色素C氧化酶亚基Ⅰ(COⅠ)基因的DNA条形码技术对蝇类进行分子鉴定。方法 选取烟台口岸常见的16只蝇类作为研究对象,形态学鉴定后,取蝇的单后足代表微量组织,提取总DNA。依据资料,选取COⅠ国际通用引物LCO1490:5′-GGT CAA CAA ATC ATA AAG ATA TTG G-3′,HCO2198:5′-TAA ACT TCA GGG TGA CCA AAA AAT CA-3′,建立PCR体系,完善PCR程序,有效扩增蝇类的COⅠ基因。纯化PCR产物后进行序列测定和比对。此外,应用Mega5.05软件分别用最大似然法、邻接法、最大简约法分析系统发育,构建系统发育树比较进化关系。结果 16只蝇类COⅠ基因扩增片段长度为690 bp,其中A+T平均含量高达68.53%。序列比对结果及系统进化关系显示,16只蝇类COⅠ基因的分子鉴定与形态学鉴定结果一致。结论 应用DNA条形码技术可成功扩增蝇类的COⅠ基因,其分子鉴定与形态学鉴定结果完全一致,尤其适用于微量组织样本的鉴定。
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关 键 词: | DNA条形码 细胞色素C氧化酶亚基Ⅰ基因 蝇类 分类鉴定 |
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