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基于环介导等温扩增技术快速鉴定宽体金线蛭
引用本文:张环宇,王文秀,高晗,谭伟,余小磊,李振国,田晓轩. 基于环介导等温扩增技术快速鉴定宽体金线蛭[J]. 天津中医药大学学报, 2022, 41(5): 649-652
作者姓名:张环宇  王文秀  高晗  谭伟  余小磊  李振国  田晓轩
作者单位:天津中医药大学, 天津 301617;天津中医药大学中医药研究院, 天津 301617;牡丹江友搏药业有限责任公司, 牡丹江 157000
摘    要:[目的] 建立中药材宽体金线蛭的环介导等温扩增(LAMP)检测技术,实现对宽体金线蛭及其常见混伪品的快速检测。[方法] 针对宽体金线蛭线粒体细胞色素氧化酶I(COI)的基因序列设计LAMP引物。在64℃恒温条件下,用设计的LAMP引物组对水蛭进行LAMP扩增。[结果] LAMP反应结束后,宽体金线蛭均扩增出梯状条带,对照组无条带产生。加入0.2 μL荧光染料10 000×SYBR Green Ⅰ后,宽体金线蛭反应液在自然光下呈绿色(阳性),对照组呈橙色(阴性)。将加入了0.2μL 10 000×SYBR Green Ⅰ的扩增产物置于紫外灯下观察,结果宽体金线蛭在紫外光下呈绿色荧光(阳性),对照组无绿色荧光产生(阴性)。[结论] 利用LAMP技术可实现宽体金线蛭及其常见混伪品的快速鉴别,为水蛭中药材的现场鉴别提供技术支撑。

关 键 词:宽体金线蛭  环介导等温扩增技术  分子鉴定  快速检测
收稿时间:2022-06-03

Rapid authentication of Whitmania Pigra Whitman based on loop-mediated isothermal amplification technology
ZHANG Huanyu,WANG Wenxiu,GAO Han,TAN Wei,YU Xiaolei,LI Zhenguo,TIAN Xiaoxuan. Rapid authentication of Whitmania Pigra Whitman based on loop-mediated isothermal amplification technology[J]. Journal of Tianjin University of Traditonal Chinese Medicine, 2022, 41(5): 649-652
Authors:ZHANG Huanyu  WANG Wenxiu  GAO Han  TAN Wei  YU Xiaolei  LI Zhenguo  TIAN Xiaoxuan
Affiliation:Tianjin University of Traditional Chinese Medicine, Tianjin 301617, China;The Institute of Traditional Chinese Medicine, Tianjin University of Traditional Chinese Medicine, Tianjin 301617, China;YouBo Pharmaceutical Co. Ltd., Mudanjiang 157000, China
Abstract:
Keywords:Whitmania Pigra Whitman  loop-mediated isothermal amplification technology  molecular identification  rapid authentication
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