| 噬菌体表面展示文库筛选人干细胞因子模拟肽 |
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| 引用本文： | 苏林,孔燕,刘长征,杨克恭,陈松森.噬菌体表面展示文库筛选人干细胞因子模拟肽[J].中国医学科学院学报,2011,33(4). |
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| 作者姓名： | 苏林 孔燕 刘长征 杨克恭 陈松森 |
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| 作者单位： | 1. 中国医学科学院北京协和医学院 基础医学研究所医学分子生物学国家重点实验室,北京,100005
2. 北京大学临床肿瘤学院北京肿瘤医院暨北京市肿瘤防治研究所肾癌和黑色素瘤内科,北京,100036 |
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| 基金项目： | 国家高技术研究发展计划项目(863项目) |
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| 摘 要： | 目的 用噬菌体表面展示文库筛选具有人干细胞因子(hSCF)生物学活性的模拟肽.方法 采用酶联免疫吸附测定法(EUSA)从噬菌体环七肽库和十二肽库筛选与重组hSCF受体(rc-kit/Ig1-3)有较高亲和力的噬菌体克隆,提取噬菌体单链DNA进行序列测定,根据序列测定结果合成阳性小肽,四甲基偶氮噻唑盐(MTT)法检测合成小肽刺激UT-7细胞增殖的活性.结果 经3轮筛选获得11个来源于环七肽库和8个来源于十二肽库与rc-kit/Ig1-3结合活性较高的噬菌体克隆,DNA测序结果显示环七肽库筛选到1个共有序列DPSSPHTH,十二肽库没有筛选到共有序列.序列比对分析显示,这些小肽与hSCF没有同源序列.MTT法测定结果表明,合成的4个小肽均能促进UT-7细胞增殖,其中CE16和LE20刺激效果明显.结论 获得4个具有较高hSCF生物学活性的模拟肽.
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| 关 键 词： | 噬菌体表面展示文库 人干细胞因子 模拟肽 筛选 酶联免疫吸附测定法 |
Bio-panning of Human Stem Cell Factor Mimetic Peptides from Phage-displayed Random Peptide Library |
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| SU Lin,KONG Yan,LIU Chang-zheng,YANG Ke-gong,CHEN Song-sen.Bio-panning of Human Stem Cell Factor Mimetic Peptides from Phage-displayed Random Peptide Library[J].Acta Academiae Medicinae Sinicae,2011,33(4). |
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| Authors: | SU Lin KONG Yan LIU Chang-zheng YANG Ke-gong CHEN Song-sen |
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| Institution: | SU Lin1,KONG Yan2,LIU Chang-zheng1,YANG Ke-gong1,CHEN Song-sen1 1National Laboratory of Medical Molecular Biology,Institute of Basic Medical Sciences,CAMS and PUMC,Beijing 100005,China 2Department of Renal Cancer and Melanoma,Beijing Cancer Hospital & Institute,Peking University School of Oncology,Beijing 100036,China |
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| Abstract: | Objective To screen human stem cell factor(hSCF) mimetic peptides in vitro with a phage-display random peptide library.Methods Phage clones with high hSCF receptor(rc-kit/Ig1-3)-binding activity was screened from phage-displayed random hepta/dodeca peptide library by phage enzyme-linked immunosorbent assay(ELISA).Phage single DNA was extracted and sequenced.Four kinds of peptide with higher c-Kit/Ig1-3 binding activity were chosen for synthesis and characterized by using cell proliferation assay with 3-(4,5... |
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| Keywords: | phage-displayed peptide library human stem cell factor mimetic peptide bio-panning enzyme-linked immunosorbent assay |
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