促血管生成素2在胃癌中的表达及其反义基因转染对人胃癌细胞SGC-7901的影响

目的：探讨促血管生成素2（angiopoietin2，Ang2）在胃癌组织中的表达及其与肿瘤病理分期的联系；观察反义 Ang2基因转染对人胃癌细胞SGC-7901的影响。方法：用Western blot法检测Ang2蛋白在10例胃癌组织及10例正常胃黏膜组织中的表达，用免疫组化法检测53例不同病理分期的胃癌组织中Ang2蛋白的表达；应用脂质体转染法将既往实验合成1]的 pEGFP-N1-anti Ang2转染体外培养的人胃癌细胞SGC-7901，以空载体（pEGFP-N1）转染组和未转染组作对照，RT-PCR及免疫组化检测转染后Ang2基因及蛋白的表达，MTT法和流氏细胞仪（flow cytometry，FCM）检测反义Ang2基因转染对细胞生长和细胞凋亡的影响；分别用上述3组细胞注射于裸鼠皮下，对比观察肿瘤生成的速度和肿瘤组织中的血管生成数量。结果：Ang2蛋白在正常胃黏膜组织中不表达，在不同病理分期的胃癌组织中均呈阳性表达（F=166.76，P＜0.000 1）；RT-PCR及免疫组化显示反义Ang２基因转染组无Ang2 mRNA及Ang2蛋白的表达，MTT法检测显示反义Ang2基因转染组细胞体外增殖能力明显低于其他两组（F=10.39，P=0.002 4），FCM检测显示其活细胞比率明显低于其他两组（χ2=3 188.980 5，P＜0.000 1）；转染了反义Ang2基因的胃癌细胞成瘤速度较其它两组明显减慢第6天（F=10.18，P=0.000 5）、第18天（F=7.8０，P=0.002 1）及第30天（F=79.58，P＜0.000 1）]，肿瘤组织中血管生成的数量较其它两组明显减少第1周（F=15.18，P＜0.000 1）、第2周（F=3.50，P=0.044 4）、第3周（F=39.02，P＜0.000 1）]。结论：胃癌组织中Ang2的表达与胃癌血管生成及胃癌侵袭能力密切相关；反义Ang2基因转染可封闭人胃癌细胞SGC-7901中Ang2 mRNA及Ang2蛋白的表达，抑制其体外生长，促进其凋亡；并对其体外成瘤性及其新生血管的生成有明显的抑制作用。

Expressions of angiopoietin2 in gastric carcinoma and effects of antisense angiopoietin2 cDNA on human gastric carcinoma cell line SGC-7901