| SIRT1基因shRNA慢病毒载体的构建及其对乳腺癌细胞增殖的影响 |
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| 引用本文： | 陶 颖,陈 可,宋春丽,任吉华,陈 娟.SIRT1基因shRNA慢病毒载体的构建及其对乳腺癌细胞增殖的影响[J].重庆医科大学学报,2013,36(5):474-477. |
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| 作者姓名： | 陶 颖 陈 可 宋春丽 任吉华 陈 娟 |
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| 作者单位： | 重庆医科大学感染性疾病分子生物学教育部重点实验室，重庆 400016 |
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| 摘 要： | 目的：探讨慢病毒介导沉默信息调节因子1（silent information regulator 1，SIRT1）基因的 shRNA对乳腺癌细胞MCF-7增殖和凋亡的影响。方法：设计、合成2对针对SIRT1基因shRNA的寡核苷酸序列，与pLentilox3.7-GFP载体连接产生重组慢病毒质粒pshSIRT1-1、pshSIRT1-2，同时构建不针对任何基因的shRNA阴性对照pshCont。将表达shRNA的载体plentilox3.7与pLP1、pLP2和pLP/VSVG 3种质粒共转染293FT细胞，包装产生慢病毒并测定病毒滴度。将慢病毒感染人乳腺癌细胞MCF-7，行real time-PCR和Western blot验证SIRT1基因的沉默效果，台盼蓝排斥实验和流式细胞仪分别检测其对MCF-7细胞增殖和凋亡的影响。结果：成功构建靶向SIRT1基因shRNA慢病毒载体并获得了相应的慢病毒。2个靶向 SIRT1的shRNA均能有效抑制SIRT1基因的表达（P=0.000 2），并使MCF-7细胞增殖明显减慢，凋亡明显增加（P=0.006 0）。结论：靶向SIRT1基因RNA干扰能显著抑制 MCF-7 细胞的生长并促进其凋亡。
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| 关 键 词： | 慢病毒 沉默信息调节因子1（SIRT1） 乳腺癌细胞 RNA干扰 |
Construction of recombinant lentiviral vector of shRNA targeting SIRT1 gene and its effects on the proliferation of breast cancer cell |
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| TAO Ying,CHEN Ke,SONG Chunli,REN Jihu,CHEN Juan.Construction of recombinant lentiviral vector of shRNA targeting SIRT1 gene and its effects on the proliferation of breast cancer cell[J].Journal of Chongqing Medical University,2013,36(5):474-477. |
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| Authors: | TAO Ying CHEN Ke SONG Chunli REN Jihu CHEN Juan |
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