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人-鼠嵌合抗血小板单抗SZ-2 Fab片段基因的构建和表达研究
引用本文:戴克胜,祝怀平,江淼,阮长耿. 人-鼠嵌合抗血小板单抗SZ-2 Fab片段基因的构建和表达研究[J]. 细胞与分子免疫学杂志, 2003, 19(1): 71-73,79
作者姓名:戴克胜  祝怀平  江淼  阮长耿
作者单位:1. 苏州大学附属第一医院血栓室,江苏省血液研究所,江苏,苏州,215006;江苏省核医学生物技术重点实验室
2. 苏州大学附属第一医院血栓室,江苏省血液研究所,江苏,苏州,215006
摘    要:目的:降低鼠源性抗血小板单克隆抗体SZ-2的免疫原性。为其进一步研究,应用奠定基础。方法:用Trizol试剂从SZ-2杂交瘤细胞抽提RNA,应用RT-PCR技术,扩增出SZ-2重链,轻链可变区基因,克隆入载体pUCm-T,测序分析,应用基因重组技术,将SZ-2轻,重链可变区基因与人免疫球蛋白γ1重链CH1和к轻链恒区基因进行拼接,构建人-鼠嵌合Fab片段基因表达质粒pSW1-2Fab/Hu,并导入大肠杆菌XL1-blue诱导表达,以ELISA,Western blot和瑞斯托霉素诱导血小板聚集抑制试验。对表达产物进行检测,验证。结果:克隆的基因序列符合小鼠轻,重链可变区基因的特征;表达质粒pSW1-2Fab/Hu拼接正确;在大肠杆菌中的表达量约为180μg/L;表达产物具有与血小板GPIb结合的特性并可抑制瑞斯托霉素诱导血小板聚集。结论:成功地克隆了SZ-2可变区基因;并表达了可溶性人-鼠嵌合Fab基因工程抗体。

关 键 词:嵌合抗体 单克隆抗体 可变区基因 血小板 基因表达
文章编号:1007-8738(2003)01-071-03

Construction and expression of mouse-human chimeric Fab fragment gene of monoclonal antibody SZ-2 against platelet
DAI Ke-sheng,ZHU Huai-ping,JIANG Miao,RU-AN Chang-gengThe First Affiliated Hospital of Suzhou University,Jiangsu Institute of Hematology,Suzhou ,China. Construction and expression of mouse-human chimeric Fab fragment gene of monoclonal antibody SZ-2 against platelet[J]. Chinese journal of cellular and molecular immunology, 2003, 19(1): 71-73,79
Authors:DAI Ke-sheng  ZHU Huai-ping  JIANG Miao  RU-AN Chang-gengThe First Affiliated Hospital of Suzhou University  Jiangsu Institute of Hematology  Suzhou   China
Affiliation:The First Affiliated Hospital of Suzhou University, Jiangsu Institute of Hematology, Suzhou 215006, China. uujihsmc@public1.sz.cn
Abstract:
Keywords:monoclonal antibody  chimeric Fab fragment  variable region genes  platelet
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