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梅毒螺旋体重组蛋白Tp0608的表达与鉴定
作者姓名:刘小军  牛淑会  蔡嘉怡  赵飞骏  余坚  姚玲  吴移谋  曾铁兵
作者单位:南华大学附属第一医院血液科;北京万泰生物药业股份有限公司;南华大学病原生物学研究所
基金项目:国家自然科学基金(81273322);湖南省自然科学基金重点项目(11JJ2044);湖南省研究生科研创新项目(CX2011B380)
摘    要:目的表达梅毒螺旋体(Tp)重组蛋白Tp0608(rTp0608)并鉴定其抗原性,为深入探讨其在梅毒血清学诊断中的价值奠定基础。方法 PCR扩增Tp0608全长基因,构建原核表达重组体pET-28a(+)/Tp0608,转化宿主菌诱导表达rTp0608,Ni-NTA亲和层析法纯化蛋白,SDS-PAGE分析蛋白表达形式与纯度,Western blot鉴定rTp0608的抗原性。结果原核表达重组体pET-28a(+)/Tp0608在宿主菌内经诱导表达了分子量大约为38 kDa的重组蛋白,以包涵体表达形式为主,纯化蛋白的纯度>95%;Western blot结果显示纯化蛋白能被梅毒患者混合血清特异性识别。结论 PET-28a(+)表达载体高效表达了rTp0608,该重组抗原有良好的抗原性。

关 键 词:梅毒  梅毒螺旋体  Tp0608  重组抗原  抗原性
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