矾酸钠和染料木黄酮对脑缺血／再灌注诱导海马神经元损伤的作用及分子机制

目的 研究矾酸钠和染料木黄酮对脑缺血，再灌注后海马神经元损伤的作用及其分子机制。方法 采用蒙古沙土鼠双侧颈总动脉结扎诱导的短暂(15min)前脑缺血模型，用底物γ-^32P掺入法测定酪氨酸蛋白激酶(PTK)的活性，免疫印迹法分析NMDA受体2B亚基(NR2B)的酪氨酸磷酸化变化；采用体外孵育的大鼠海马脑片模拟缺血模型，测定海马神经元细胞乳酸脱氢酶(1actate dehydrogenase，LDH)的漏出量作为神经元损伤的指标。结果 沙土鼠缺血，再灌6h，海马突触体总PTK活性显著升高，缺血前20min腹腔注射染料木黄酮对PTK总活性有明显的降低作用，而矾酸钠对其却无明显作用；短暂前脑缺血，再灌注6h后，NR2B的酪氨酸磷酸化显著增加，矾酸钠与染料木黄酮可分别增加、减少这种磷酸化的增加，而对NR2B的蛋白表达无明显作用；大鼠海马脑片“缺血”30min／再灌1h，细胞LDH的漏出量明显增加，“缺血”前15min，在海马脑片孵育液中加入矾酸钠与染料木黄酮可分别增加、减少LDH的漏出量。结论 PTK和酪氨酸蛋白磷酸酶(PTP)共同参与缺血性脑损伤的调节，而PTK起着更为重要的作用。