| 中金钗石斛相关序列扩增多态性反应体系的正交优化研究药大质量观及实践 |
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| 引用本文： | 赵红燕,冯尚国,沈 波,王慧中.中金钗石斛相关序列扩增多态性反应体系的正交优化研究药大质量观及实践[J].医学教育探索,2010,41(8):1353-1358. |
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| 作者姓名： | 赵红燕 冯尚国 沈 波 王慧中 |
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| 作者单位： | 杭州师范大学 生物化学与分子生物学杭州市重点实验室，浙江 杭州 310036;杭州师范大学 生物化学与分子生物学杭州市重点实验室，浙江 杭州 310037;杭州师范大学 生物化学与分子生物学杭州市重点实验室，浙江 杭州 310038 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金资助项目 (30670199， 30770185， 30870180)； 浙江省自然科学基金资助项目 (X305692， X301406)； 浙江省科技计划资助项目 (2008C12081)； 杭州市重点实验室项目 (20080432T06)； 钱江人才计划资助项目 |
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| 摘 要： | 目的 建立金钗石斛Dendrobium nobile相关序列扩增多态性 (SRAP) 反应体系，为金钗石斛分子生物学研究提供技术支持。方法 运用 L25(56) 正交设计对影响金钗石斛 SRAP 反应的5个因素：模板 DNA、Mg2+、dNTPs、Taq 酶、引物在5个水平上进行优化试验，对 PCR 结果进行极差分析。结果 金钗石斛 SRAP 反应最佳体系为：25 μL PCR 体系中含有 20 ng 模板 DNA，2.0 mmol/L Mg2+,0.2 mmol/L dNTPs, 1 U Taq 酶，0.6 μmol/L 引物。各因素对 SRAP 反应的影响依次为：〖WTBX〗Taq 酶＞Mg2+＞dNTPs＞模板 DNA＞引物。结论 所建立的金钗石斛 SRAP 反应体系具有标记位点清晰、多态性丰富、稳定性好等特点，可用于金钗石斛分子生物学的研究。
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| 关 键 词： | 金钗石斛 SRAP 优化 正交设计 |
Optimization of sequence-related amplified polymorphism system in Dendrobium nobile based on orthogonal design |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Dendrobium nobileLindl sequence-related amplified polymorphism (SRAP) optimization orthogonal design |
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