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微泡造影剂结合超声介导一氧化氮合成酶基因转染血管平滑肌细胞
引用本文:胡敏,张凯伦,项飞翔,潘铁成,魏翔,朱学海.微泡造影剂结合超声介导一氧化氮合成酶基因转染血管平滑肌细胞[J].华中科技大学学报(医学版),2012,41(5):589-592,602.
作者姓名:胡敏  张凯伦  项飞翔  潘铁成  魏翔  朱学海
作者单位:1. 华中科技大学同济医学院附属同济医院心胸外科,武汉,430030
2. 华中科技大学同济医学院附属协和医院心脏外科,武汉,430022
3. 华中科技大学同济医学院附属协和医院超声影像科,武汉,430022
基金项目:湖北省自然科学基金资助项目(No.2008CDA018)
摘    要:目的 探讨微泡造影剂及超声辐照介导内皮型一氧化氮合成酶(eNOS)基因转染体外培养大鼠血管平滑肌细胞(VSMCs)的可行性.方法 实验分为A、B、C、D、E5组,分别为空白对照组、单纯质粒浸泡组、质粒+微泡造影剂组、质粒+超声辐照组、质粒+超声辐照+造影剂组.用重组真核表达载体pcDNA3.1- eNOS经微泡造影剂及超声辐照介导转染体外培养的大鼠VSMCs,辐照条件为超声探头频率为10 MHz,机械指数为1.9,辐照时间为10 min,重组真核细胞表达载体pcDNA3.1-eNOS 5μg/mL.辐照48 h后,采用RT-PCR、Western blot及免疫组化检测VSMCs内eNOSmRNA和蛋白的表达.结果 RT -PCR检测E组eNOS mRNA的表达最显著,积分吸光度(IA)比值为(91.11±3.41)%,B、C、D组也有少量表达,IA比值分别为(26.10±1.32)%、(31.42±2.43)%、(35.05±2.25)%,与E组相比均P<0.05.蛋白印迹分析eNOS蛋白表达,A组有极少量表达,B、C、D组也有少量表达,IA比值分别为(22.12±1.33)%、(25.42±2.41)%、(33.11±3.11)%,而E组表达最明显,IA比值为(84.22±9.22)%,与各组相比均P<0.05.结论 超声辐照结合微泡造影剂能显著提高eNOS基因在VSMCs的转染效率,提高细胞内一氧化氮合成酶的表达.

关 键 词:超声造影剂  微泡  一氧气化氮合成酶基因  血管平滑肌细胞

Transfection of Nitric Oxide Synthase Gene into Vascular Smooth Muscle Cells Mediated by Ultrasound Combined with Microbubble Contrast Agent
Institution:Hu Min1,Zhang Kailun2,Xiang Feixiang3 et al 1Department of Cardiothoracic Surgery,Tongji Hospital,Tongji Medical College,Huazhong University of Science and Technology,Wuhan 430030,China 2Department of Cardiovascular Surgery,3Department of Ultrasonography,Union Hospital, Tongji Medical College,Huazhong University of Science and Technology,Wuhan 430022,China
Abstract:
Keywords:
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